[發明專利]一種用于藥物篩選的頸動脈分叉三維細胞培養模型及其構建方法

在審

• 申請號: 201811152135.4
• 申請日: 2018-09-29
• 公開（公告）號: CN109294971A
• 公開（公告）日: 2019-02-01
• 發明（設計）人: 林蓉;王博;陳若夢;劉亞雄;王維蓉;楊廣德;何延浩;商晨旭;姚鳳;高鴻倩
• 申請（專利權）人: 西安交通大學
• 主分類號: C12N5/071
• 分類號: C12N5/071
• 代理公司: 西安通大專利代理有限責任公司 61200
• 代理人: 徐文權

1.一種用于藥物篩選的頸動脈分叉三維細胞培養模型的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

1)制備三維中空水凝膠流道

首先根據統計得到的人體頸動脈血管形態和尺寸數據，通過計算機輔助建模軟件設計得到仿生頸動脈血管結構模型，然后基于光固化3D打印技術制備具有三維中空仿生血管結構的水凝膠流道；

2)制備頸動脈分叉三維細胞培養模型

制備濃度為1×10⁵～2×10⁶Cells/mL的HUVEC混懸液，然后將HUVEC混懸液灌入步驟1)制得的水凝膠流道中，旋轉種植使細胞貼壁生長，再向水凝膠流道中加入培養基，于37℃、5％二氧化碳的氣體培養箱中孵育1～4d，制得頸動脈分叉三維細胞培養模型。

2.根據權利要求1所述的用于藥物篩選的頸動脈分叉三維細胞培養模型的制備方法，其特征在于，步驟2)中，制備濃度為1×10⁵～2×10⁶Cells/mL的HUVEC混懸液，具體操作如下：

取內皮細胞或平滑肌細胞，以低糖DMEM作為培養基進行細胞常規培養，先用胰酶消化處理，再經低速離心處理，然后加入含有8％～12％胎牛血清的培養基，獲得濃度為1×10⁵～2×10⁶Cells/mL的HUVEC混懸液。

3.根據權利要求2所述的用于藥物篩選的頸動脈分叉三維細胞培養模型的制備方法，其特征在于，所述低速離心處理是在800～1000rpm離心處理5～10min。

4.采用權利要求1～3中任意一項所述的制備方法制得的用于藥物篩選的頸動脈分叉三維細胞培養模型。

5.根據權利要求4所述的用于藥物篩選的頸動脈分叉三維細胞培養模型，其特征在于，所述頸動脈分叉三維細胞培養模型能夠模擬人體不同病理環境下的刺激因子。

6.根據權利要求5所述的用于藥物篩選的頸動脈分叉三維細胞培養模型，其特征在于，刺激因子包括炎癥刺激因子、高糖刺激因子和高尿酸刺激因子。