[發明專利]一株能夠同時防治煙草黑脛病和根黑腐病且具有促生作用的格拉納達假單胞菌及其應用

有效

• 申請號: 201811149201.2
• 申請日: 2018-09-29
• 公開（公告）號: CN109136154B
• 公開（公告）日: 2021-06-04
• 發明（設計）人: 劉紅彥;文藝;千慧敏;趙輝;劉玉霞;李小杰;李淑君;倪云霞;劉新濤;李成軍
• 申請（專利權）人: 河南省農業科學院植物保護研究所
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/02;A01N63/27;A01P3/00;A01P21/00;C12R1/38
• 代理公司: 鄭州市華翔專利代理事務所(普通合伙) 41122
• 代理人: 張愛軍;徐文婷

本發明公開了一株能夠同時防治煙草黑脛病和根黑腐病且具有促生作用的格拉納達假單胞菌及其應用，所述的格拉納達假單胞菌為格拉納達假單胞菌(Pseudomonas granadensis)PF3402，已保藏于中國典型培養物保藏中心，保藏地址：武漢市武昌珞珈山，保藏編號：CCTCC M 2018545，保藏日期：2018年08月17日。本發明通過平板對峙抑菌、防病和盆栽促生實驗，首次從阿爾山上的土壤中篩選出能夠同時防治煙草黑脛病和根黑腐病的生防菌PF3402，經鑒定該菌株為格拉納達假單胞菌，同時該菌株還具有促進煙苗生長的作用。試驗表明，本發明的PF3402對煙草黑脛病和根黑腐病的病原菌均具有良好的抑制作用，對兩種煙草病害的防效均能達到60％以上。

技術領域

本發明涉及一株能夠同時防治煙草黑脛病和根黑腐病且具有促生作用的格拉納達假單胞菌、篩選方法及其應用，屬于微生物技術領域。

背景技術

煙草是我國主要經濟作物之一，是植煙地區收入的重要來源，現已發現其具有較大的藥用和保健價值，且能夠作為生物科學最佳的模式材料。但煙草病害制約著煙草的健康生長，尤其是煙草黑脛病、煙草根黑腐病等土傳病害的發生會造成煙草減產，發病嚴重時會造成毀滅性的損失。

煙草黑脛病是煙草生產上危害最嚴重的土傳病害之一，病原物為煙草疫霉(Phytophthora nicotianae)。該病害多發生于大田成株期，癥狀主要有“黑脛”、“穿大褂”、“黑膏藥”、“碟片狀”、“腰爛”，煙草黑脛病屬高溫高濕型病害，相對濕度高時田間會出現發病高峰，嚴重時能夠造成整株成片死亡。

煙草根黑腐病是世界性的煙草病害，也是我國煙草主要病害之一，其病原物為根串珠霉菌(Thielaviopsis basicola)。根黑腐病主要發生在煙草根部，幼苗染病時可引起“猝倒”，使整株煙苗毀壞；較大煙株染病則病株葉片變黃、變薄，極大的影響煙草產量和品質，嚴重發生時可導致煙田絕收。

隨著國內煙草種植面積擴大，連作煙田的增多，煙草黑脛病和煙草根黑腐病等土傳病害的危害不斷加重，在部分煙區已成為影響煙草發展的主要病害。生產上煙田防治土傳病害多以化學防治為主，農藥的長期使用容易產生環境污染、農藥殘留和耐藥病原菌等問題。

生物防治在煙草土傳病害控制方面已經受到學者的重視，有關煙草黑脛病和根黑腐病生防菌的篩選及其菌劑和應用已被廣泛研究。我國已公開的對煙草黑脛病有效的生防菌株主要有枯草芽孢桿菌、沙福芽孢桿菌、短短芽孢桿菌、青霉菌和淡紫擬青霉等幾類，而對煙草根黑腐病有效的生防菌較少，且能夠同時防治煙草黑脛病和根黑腐病這兩種容易混合發生的生防菌株則更少，因此篩選對這兩種病害同時有效且對煙草有促生作用的生防菌株具有重要的理論和實踐意義。

發明內容

針對現有技術的不足，本發明的目的是提供一株能夠同時防治煙草黑脛病和根黑腐病且具有促生作用的格拉納達假單胞菌、篩選方法和應用，該格拉納達假單胞菌能夠同時防治煙草黑脛病和根黑腐病，且能促進煙苗生長。

為了實現上述目的，本發明所采用的技術方案是：

一株能夠同時防治煙草黑脛病和根黑腐病且具有促生作用的格拉納達假單胞菌，所述的格拉納達假單胞菌為格拉納達假單胞菌(Pseudomonas granadensis)PF3402，已保藏于中國典型培養物保藏中心，保藏地址：武漢市武昌珞珈山，保藏編號：CCTCC NO：M2018545，保藏日期：2018年08月17日。

一種能夠同時防治煙草黑脛病和根黑腐病且具有促生作用的格拉納達假單胞菌的篩選方法，采集內蒙古阿爾山上的土壤，稱取1g土壤，加入10ml無菌水中充分振蕩獲得土壤懸浮液，然后將土壤懸浮液搖勻后進行稀釋，取0.1ml稀釋液涂布于含8-羥基喹啉的KB固體平板上，28℃培養，至菌落長出后分離純化，然后篩選出對煙草疫霉和根串珠霉具有抑制效果的菌株，并鑒定，得到格拉納達假單胞菌PF3402。

一種格拉納達假單胞菌在同時防治煙草黑脛病和根黑腐病方面的應用。