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[發明專利]重組酵母菌催化合成萊鮑迪苷M的方法有效

專利信息
申請號: 201811148603.0 申請日: 2018-09-29
公開(公告)號: CN109234340B 公開(公告)日: 2020-06-09
發明(設計)人: 王勇;呂華軍;孫雨偉;李建華;裴亮;華君 申請(專利權)人: 四川盈嘉合生科技有限公司
主分類號: C12P19/56 分類號: C12P19/56
代理公司: 成都希盛知識產權代理有限公司 51226 代理人: 張徭堯;柯海軍
地址: 610000 四川省成都市高*** 國省代碼: 四川;51
權利要求書: 查看更多 說明書: 查看更多
摘要:
搜索關鍵詞: 重組 酵母菌 催化 合成 萊鮑迪苷 方法
【權利要求書】:

1.一種重組酵母菌催化合成萊鮑迪苷M的方法,其特征在于:以萊鮑迪苷A為底物,以重組酵母菌為催化劑,在蔗糖、氯化鋅和檸檬酸三鈉的存在下,催化底物進行反應,反應后,過濾,并加熱濾液使重組微生物失活,得到粗制萊鮑迪苷M溶液,再進行純化濃縮,得到萊鮑迪苷M;

其中,重組酵母菌的菌體濃度OD600為80~120,萊鮑迪苷A濃度為1~80g/L;檸檬酸三鈉濃度為50~80mmol/L,氯化鋅濃度為0.5~2mmol/L,蔗糖濃度為30~50%(W/V),pH值為7.5~8.5,所述重組酵母菌含有EUGT11編碼基因和UGT76G1編碼基因,且該重組酵母菌敲除了pgm基因、glgC基因和agp基因。

2.根據權利要求1所述的重組酵母菌催化合成萊鮑迪苷M的方法,其特征在于:將該重組酵母菌的ushA基因替換為包含BaspugpA基因的T5操縱子。

3.根據權利要求1所述的重組酵母菌催化合成萊鮑迪苷M的方法,其特征在于:反應溫度為35~40℃,反應時間為20~60h。

4.根據權利要求1所述的重組酵母菌催化合成萊鮑迪苷M的方法,其特征在于:重組酵母菌的菌體濃度OD600為100,萊鮑迪苷A濃度為5g/L;檸檬酸三鈉濃度為60mmol/L,氯化鋅濃度為1mmol/L,蔗糖濃度為40%(W/V),pH值為8.0。

5.根據權利要求1~4任一項所述的重組酵母菌催化合成萊鮑迪苷M的方法,其特征在于:反應溫度為37℃,反應時間為24h。

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