[發(fā)明專利]一種保健品中褪黑素的快速檢測方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201811148490.4
• 申請日: 2018-09-29
• 公開（公告）號: CN109239063A
• 公開（公告）日: 2019-01-18
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 庚平;張珂;黃光榮;唐玉龍
• 申請（專利權(quán)）人: 杭州天邁生物科技有限公司
• 主分類號: G01N21/78
• 分類號: G01N21/78;G01N21/31
• 代理公司: 杭州杭誠專利事務(wù)所有限公司 33109
• 代理人: 尉偉敏

本發(fā)明屬于檢測技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明公開了一種保健品中褪黑素的快速檢測方法，其包括提取處理、快速檢測、精確檢測和褪黑素含量確定等步驟，其中采用乙醇水溶液作為提取劑，采用對二甲氨基苯甲醛鹽酸乙醇溶液作為顯色劑，精確檢測步驟中采用分光光度計進(jìn)行定量精確檢測。本發(fā)明操作步驟簡單、檢測速度快，適合普通民眾使用，特別適合非專業(yè)人員在現(xiàn)場對樣品進(jìn)行快速檢測；本發(fā)明可以使用分光光度法進(jìn)行進(jìn)一步的精確定量檢測，靈敏度高，抗干擾能力強，檢出限可達(dá)0.005mg/g，準(zhǔn)確率高。本發(fā)明檢測成本低，試劑可常溫保存，保質(zhì)期長，操作簡單，可以滿足廣大農(nóng)村地區(qū)開展相關(guān)的食品監(jiān)督檢驗的需要。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及檢測技術(shù)領(lǐng)域，尤其是涉及一種保健品中褪黑素的快速檢測方法。

背景技術(shù)

褪黑素，又稱松果腺素，抑黑素，主要是由哺乳動物和人類的松果體產(chǎn)生的一種胺類激素，具有調(diào)節(jié)晝夜節(jié)律、睡眠、內(nèi)分泌及抗衰老等多種重要生理功能。

目前市場上，存在許多解決失眠問題的保健品，到目前為止，我國衛(wèi)生部先后批準(zhǔn)了20種含有褪黑素的產(chǎn)品作為“改善睡眠”的保健品，它作為一種新型的保健品有著巨大的潛力，但有部分商家會利用褪黑素的鎮(zhèn)靜、催眠的效果，在保健品中加入大量褪黑素，會造成人體體溫降低、釋放過多泌乳激素導(dǎo)致不孕、降低男性性欲、引發(fā)呼吸問題等對人體健康造成危害。在我國，褪黑素作為保健品使用，有明確的法律規(guī)定：日服用劑量為1～3mg，不得添加除維生素B6以外的其他成分。

現(xiàn)有的檢驗保健品中褪黑素含量的方法主要有以下五種：

1、薄層色譜法

樣品中的待測成分經(jīng)過甲醇提取，所得的供試品溶液與對照品溶液點在硅膠薄層板上，用展開劑展開，取出，晾干，置紫外燈254nm下檢視。在展開劑的作用下，由于不同物質(zhì)的遷移速度不同，不同物質(zhì)在薄層色譜板的不同位置以斑點的形式出現(xiàn)，根據(jù)待測樣品是否在與對照品相應(yīng)的位置上出現(xiàn)斑點這一試驗所得的現(xiàn)象來判斷待測樣品是否含有目標(biāo)成分。如果供試品薄層色譜圖與褪黑素對照品相應(yīng)的位置上出現(xiàn)斑點，則表明樣品中可能含有褪黑素成分。

薄層色譜法的優(yōu)點是不需要昂貴的分析儀器。該法缺點是：(1)色譜展開及晾干的時間較長，不足以滿足快速測定的要求。(2)薄層色譜板對存放條件及環(huán)境較高，需要干燥存放，環(huán)境溫度和濕度對分離效果的影響較大。(3)需要有固定的場所，不適合作流動性大的現(xiàn)場檢測。(4)要求實驗人員有熟練的操作經(jīng)驗。

2、高效液相色譜法

高效液相色譜法是常用的分析方法，在相同的色譜條件下，不同的物質(zhì)有不同的色譜保留時間。在相同的色譜條件下褪黑素對照品溶液與樣品提取所得供試品溶液分別進(jìn)樣，根據(jù)色譜峰保留時間可判斷待測樣品是否含有褪黑素成分。

高效液相色譜法的優(yōu)點是色譜分離效率高、靈敏度高，其缺點是：(1)儀器價格昂貴，樣品前處理時間長，分析成本高；(2)當(dāng)共存成分的色譜保留時間與褪黑素的色譜保留時間接近時容易作出錯誤的判斷；(3)儀器對使用環(huán)境要求高，不適合作流動性大的現(xiàn)場檢測。

3、高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法

用質(zhì)譜儀對物質(zhì)進(jìn)行定性分析，結(jié)果可靠性高。以高效液相色譜儀作為分離器、質(zhì)譜儀作為分析器的高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法適合于成分復(fù)雜、背景干擾嚴(yán)重的樣品分析，這種分析方法可提高檢測結(jié)果的可靠性，檢測結(jié)果較準(zhǔn)確。

高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法是一種比高效液相色譜法分析成本更高、操作更復(fù)雜的分析方法，適合于成分復(fù)雜、背景干擾嚴(yán)重的樣品分析。儀器對使用環(huán)境要求更高，需要固定擺放，不適合作流動性大的現(xiàn)場檢測。

4、酶聯(lián)免疫法