[發明專利]分子量≦5 000Da的黨參寡糖在制備清除DPPH自由基的抗氧化活性藥物中的應用

有效

• 申請號: 201811146515.7
• 申請日: 2018-09-29
• 公開（公告）號: CN109223808B
• 公開（公告）日: 2021-06-01
• 發明（設計）人: 胡芳弟;馬銘;茍曉丹;白瑞斌;王燕萍;張靜
• 申請（專利權）人: 蘭州大學
• 主分類號: A61K31/7016
• 分類號: A61K31/7016;A61K31/702;A61K31/715;A61P39/06;C08B37/00
• 代理公司: 北京伊諾未來知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 11700
• 代理人: 李戍

本發明公開了分子量≦5000Da的黨參寡糖在制備清除DPPH自由基的抗氧化活性藥物中的應用，并細化了黨參寡糖的制備方法。本發明的有益效果為：本發明提供的黨參寡糖在制備清除DPPH自由基的抗氧化活性藥物中的應用，驗證發現黨參寡糖具有可以與Vc相媲美的體外抗氧化活性，通過對黨參寡糖的單糖組成研究發現黨參寡糖主要是由葡萄糖、果糖組成，另外還有極少量的甘露糖、鼠李糖、阿拉伯糖等。黨參寡糖是由分子量173～1384的糖類化合物組成的糖混合物。采用PLS法進一步研究黨參寡糖的單糖組成與其DPPH自由基清除活性的關聯發現，鼠李糖、阿拉伯糖、葡萄糖對DPPH自由基清除活性呈正相關，木糖、甘露糖、半乳糖對DPPH自由基清除活性呈負相關。

技術領域

本發明涉及醫藥生物技術領域，具體涉及黨參寡糖在制備清除DPPH自由基的抗氧化活性藥物中的應用。

背景技術

黨參為桔梗科植物黨參Codonopsis pilosula(Franch.)Nannf.，素花黨參Codonopsis pilosula Nannf.var.modesta(Nann.f)L.T.Shen或川黨參Codonopsistangshen Oliv.的干燥根，具有“補中益氣、健脾益肺”之功效。糖類化合物是黨參中的重要化學成分，可分為單糖、多糖和低聚糖，但是對于黨參糖類化合物的研究主要集中在多糖，多糖可抗氧化，抗腫瘤及提高免疫力。對于黨參中寡糖類成分(分子量≦5 000Da)卻鮮有報道。

前期研究發現17批不同產地的黨參藥材中粗寡糖含量為8.10～33.92g/100g；Sephadex G-25洗脫得率為(81.9～89.2)％，糖含量較高，說明黨參寡糖類成分是黨參中的重要組分；通過抗氧化活性實驗發現黨參各組分的DPPH自由基清除活性強弱依次為：寡糖粗寡糖95％乙醇提取物醇提后水提取物粗多糖，說明黨參寡糖類成分是黨參中重要的活性組分。因此對黨參寡糖類化合物的深入研究是十分必要的。

糖類化合物的單糖組成是研究其結構、性質及構效關系的一項基本內容，很多研究表明同種生物中的糖類化合物，由于其單糖組成不同，活性之間有著巨大的差異。張培等人研究發現黨參多糖對HepG2的細胞毒活性與其單糖的種類存在相關性，含有半乳糖醛酸相對較高的黨參多糖的細胞毒活性較強。鄔澄飛等人研究發現低聚糖單糖構成種類增加，乳桿菌群增殖，短鏈脂肪酸含量提高，半乳糖比例的提高增強了短鏈脂肪酸中乙酸、丙酸含量。

因此，系統的研究糖類化合物的單糖組成與活性之間的相關性對于糖類化合物構效關系的研究具有重要意義。但目前尚未文獻報道黨參寡糖的單糖組成與其抗氧化之間的相關性。

發明內容

本發明的目的就是針對上述現有技術中的缺陷，提供了黨參寡糖在制備清除DPPH自由基的抗氧化活性藥物中的應用。

為了實現上述目的，本發明提供的技術方案為：黨參寡糖在制備清除DPPH自由基的抗氧化活性藥物中的應用。

進一步的，上述的黨參寡糖在制備體外抗氧化活性藥物中的應用，所述黨參寡糖的制備方法，包括以下步驟：

1)取10g黨參粗粉，10倍量95％乙醇回流提取2次，1h/次，藥渣晾干后，以10倍量水煎煮三次，45min/次，合并水煎液，50℃,60rpm減壓濃縮至原體積的1/2～1/4，加95％乙醇至終濃度為80％，靜置過夜，離心力10 600×g,離心15min()，上清液回收乙醇，即得到粗寡糖；

2)取粗寡糖溶于少量水中，上適宜規格的Sephadex G-25純化，蒸餾水洗脫，洗脫流速為1mL/min～10mL/min，每管收集5mL-40mL；以苯酚硫酸法490nm進行檢測，以試管號為橫坐標，糖含量為縱坐標，作曲線，根據曲線合并洗脫液，50℃、60rpm減壓濃縮近干狀態，-80℃冰箱中4h，取出置冷凍干燥(24h)，得干燥的粉末，為黨參寡糖成分(分子量≦5000Da)。

本發明的第二個目的是提供了一種清除DPPH自由基的抗氧化活性藥物，由有效量做為活性成分的黨參寡糖和助劑組成。