[發明專利]用于在體基因治療的基因編輯組合物或試劑盒

有效

• 申請號: 201811144025.3
• 申請日: 2018-09-26
• 公開（公告）號: CN109266648B
• 公開（公告）日: 2021-10-19
• 發明（設計）人: 薛天;才源
• 申請（專利權）人: 中國科學技術大學
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;C12N9/22;A61K48/00;A61K31/7088;A61P9/10;A61P21/00;A61P1/16;A61P13/12;A61P3/00
• 代理公司: 中科專利商標代理有限責任公司 11021
• 代理人: 張瑩

1.一種基因編輯組合物或試劑盒，其包含1)靶向目的突變基因的與結合蛋白的核酸分子連接的sgRNA復合物或其編碼序列，2)修復目的突變基因的模板核酸或其編碼序列，3)sgRNA復合物引導的核酸酶或其編碼序列，和4)與核酸結合蛋白融合的促進同源重組的蛋白或其編碼序列，其中所述核酸結合蛋白能夠與上述1)中的核酸分子結合，其中所述促進同源重組的蛋白為RecA。

2.權利要求1所述的組合物或試劑盒，其中所述目的突變基因是由于其突變導致疾病的基因。

3.權利要求1或2所述的組合物或試劑盒，其中所述目的突變基因是由于其突變導致遺傳性疾病的基因。

4.權利要求1或2所述的組合物或試劑盒，其中所述目的突變基因是Pde6b基因，Fah基因，或dystrophin基因。

5.權利要求1或2所述的組合物或試劑盒，其中所述sgRNA復合物為靶向所述目的突變基因的sgRNA復合物。

6.權利要求1或2所述的組合物或試劑盒，其中所述sgRNA復合物是包含SEQ ID NO:2所示的序列的sgRNA復合物。

7.權利要求1或2所述的組合物或試劑盒，其中所述核酸結合蛋白包括MS2蛋白，RPA-4亞基，BRCA2，XRCC2，XRCC3，RadA，HNRNPA1，NABP2(SSB1)，NABPI(SSB2)和UHRF1，所述結合蛋白的核酸分子包括能夠被上述蛋白特異性識別的核酸序列。

8.權利要求7所述的組合物或試劑盒，其中所述結合蛋白的核酸分子包括發夾序列。

9.權利要求7所述的組合物或試劑盒，其中所述結合蛋白的核酸分子包括被MS2蛋白特異性識別的SEQ ID NO:3所示的發夾序列。

10.權利要求1或2所述的組合物或試劑盒，其中組合物或試劑盒的成分1)、2)、和3)存在于一個或多個載體中。

11.權利要求10所述的組合物或試劑盒，其中組合物或試劑盒的成分1)、2)、3)和4)存在于一個或多個載體中。

12.權利要求1或2所述的組合物或試劑盒，其中所述修復目的突變基因的模板核酸為將突變的目的基因恢復為野生型基因序列或所需序列的同源互補修復模板。

13.權利要求1或2所述的組合物或試劑盒，其中所述修復目的突變基因的模板核酸為單鏈模板核酸或雙鏈模板核酸。

14.權利要求1或2所述的組合物或試劑盒，其中所述修復目的突變基因的模板核酸為單鏈DNA模板，雙鏈DNA模板或環狀質粒模板。

15.權利要求1或2所述的組合物或試劑盒，其中所述sgRNA復合物引導的核酸酶包括CRISPR酶。

16.權利要求1或2所述的組合物或試劑盒，其中所述sgRNA復合物引導的核酸酶包括Cas9。

17.權利要求1或2所述的組合物或試劑盒，其中所述sgRNA復合物引導的核酸酶包括spCas9和saCas9。

18.權利要求1-17任一項定義的組合物或試劑盒在制備用于治療基因突變導致的疾病的藥物中的用途。

19.權利要求18所述的用途，其中所述疾病為遺傳性疾病。

20.權利要求19所述的用途，其中所述疾病為遺傳性色素性視網膜炎、遺傳性肌肉硬化癥或遺傳性酪氨酸血癥。