[發明專利]一種用于六孔板的細胞圓形傷痕愈合實驗裝置

在審

• 申請號: 201811137312.1
• 申請日: 2018-09-17
• 公開（公告）號: CN109055218A
• 公開（公告）日: 2018-12-21
• 發明（設計）人: 畢楊;何懿晨;梁小華;方姝煜;龔夢嘉
• 申請（專利權）人: 重慶醫科大學附屬兒童醫院
• 主分類號: C12M3/00
• 分類號: C12M3/00;C12M1/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明提供了一種適用于六孔板的細胞傷痕愈合實驗裝置，包括片狀物(1)，片狀物底部設置有十字交叉結構(2)；在十字交叉結構的十字端底部設置有圓柱體結構(3)。本發明提供一種適用于六孔板的圓形細胞傷痕愈合實驗裝置，方便觀察整個視野中的傷痕愈合，避免目前細胞劃痕實驗只能觀察劃痕局部區域愈合的情況。

技術領域

本發明涉及細胞生物學領域，公開了一種制備圓形傷痕的細胞傷痕愈合實驗裝置。

技術背景

細胞傷口愈合實驗是目前最常用的一種研究細胞遷移能力的體外實驗方法。其基本原理是：當細胞生長融合至單層狀態時，在單層培養細胞上人為制造一個“傷痕”，邊緣的細胞會逐漸進入空白區域使“劃痕”愈合。通過計算細胞傷痕的愈合率，評估細胞的遷移能力，在一定程度上模擬了體內細胞遷移的過程。體外改變細胞遷移和/或生長的因素可以增加或降低傷口愈合率，因此，本實驗常用于研究各種實驗條件比如基因調控和藥物在細胞遷移中的作用。本實驗操作簡單，費用廉價。

傳統的細胞傷口愈合實驗方法是用槍頭輕輕在單層細胞上間劃痕，劃痕橫穿過孔板，槍頭盡量與孔板的底部垂直，劃痕的距離可以選用不同型號的槍頭調節。劃痕在同一方向成一條直線。首先：人工制造的“劃痕”很難保證一致性，實驗誤差大，干擾因素多，且手動劃痕可能會劃傷培養器皿表面的包被，進而影響實驗結果。其次，細胞傷痕愈合實驗需要連續觀察以評估處理因素對細胞遷移的作用，傳統方法是在培養板背面預先劃線標記觀察位置，但是在實驗前無法預知細胞生長情況，在顯微鏡下每次的觀測點也不可能做到完全一致，且傳統方法計算的是某一個部位的遷移距離，只能獲得局部細胞遷移的數據。

發明內容：

本發明針對現有細胞劃痕實驗技術的不足，設計了一種適用于六孔板的細胞傷痕愈合實驗裝置，可獲得圓形的細胞傷痕，從二維角度評估細胞的整體遷移情況。

實現本發明的技術方案如下：

一種適用于六孔板的細胞傷痕愈合實驗裝置，包括片狀物(1)，片狀物頂面設置有十字交叉結構(2)，片狀物(1)底面設置有圓柱體(3)，圓柱體(3)對應設置于十字交叉結構的4個十字端(6)下方。

上述片狀物為圓形，十字交叉結構(2)的交叉點(5)位于圓形片狀物的圓心位置。

上述十字交叉結構為長度(L)3.48cm，高度(H)1.0cm，厚度(T)0.2cm；圓形片狀物的直徑(D)1.88cm，厚度(T)0.1cm。

上述圓柱體(3)高度(H)0.3cm，底面直徑(D)0.2cm。

上述圓片狀物(1)固定于十字交叉結構(2)，圓柱體(3)固定于圓片狀物(1)；圓柱體結構(3)為4個，分別對應位于交叉結構(2)的4個十字端(6)中點下方。

上述片狀物(1)和十字交叉結構(2)、圓柱形結構(3)為不銹鋼材質。

有益效果

1.本裝置提供一種適用于六孔板的細胞傷痕愈合實驗，在一個6孔板中獲得4個底部直徑為0.2cm的圓形細胞傷痕，在顯微鏡下方便觀察整個視野中的細胞傷痕愈合情況，可以通過計算傷痕的總面積，獲得細胞傷痕愈合率。避免細胞目前細胞劃痕實驗只能觀察劃痕局部區域的愈合情況。(0.2cm為在顯微鏡40×視野下可觀察到的最大直徑)。

2.本裝置對細胞培養無毒性作用，可高溫高壓反復消毒，重復使用，經濟實用環保。

3.本裝置提供的裝置適用于6孔板，細胞培養前放置在6孔板中，加入細胞，待細胞貼壁后，取下裝置后，能見到邊緣整齊的圓形細胞傷痕，可在顯微鏡下動態觀察細胞愈合的整體情況，通過一次實驗即可在六孔板中制造4個圓形細胞傷痕，可獲得多個實驗重復數據，有助于評估實驗結果，大大節約實驗成本，節省實驗時間。

4.采用本裝置能很好的用于各種細胞的傷痕愈合實驗，并能很好的保持細胞活性。