[發明專利]一種尿液中氧化三甲胺快速檢測方法及檢測試劑盒

在審

• 申請號: 201811131164.2
• 申請日: 2018-09-27
• 公開（公告）號: CN109387507A
• 公開（公告）日: 2019-02-26
• 發明（設計）人: 趙洪斌;郭飛;李曉暉;梁毅偈;余鵬;郭凡財;歐陽冬生
• 申請（專利權）人: 長沙都正醫學檢驗有限責任公司;長沙都正生物科技有限責任公司
• 主分類號: G01N21/78
• 分類號: G01N21/78;G01N21/82
• 代理公司: 廣州嘉權專利商標事務所有限公司 44205
• 代理人: 伍傳松

本發明公開了一種尿液中氧化三甲胺快速檢測方法，包括以下步驟：調節尿液pH，加入雷氏鹽，搖勻后反應，通過比色分析法或吸光光度法確定尿液中TMAO的含量。在對尿液的pH值進行調節前還可以包括用生石灰對尿液進行預處理的步驟，以前在預處理前對所述尿液的進行pH值測試，若pH值小于7，則將尿液的pH值調節至7以上。所述試劑盒包括pH調節劑、顯色試劑和前處理試劑，所述前處理試劑中包含有生石灰，所述顯色試劑中包含有雷氏鹽。通過本發明方案可實現快速準確的測定溶液中的TMAO濃度。

技術領域

本發明涉及檢測技術領域，具體涉及一種尿液中氧化三甲胺快速檢測方法及檢測試劑盒。

背景技術

氧化三甲胺(Trimetlylamine oxide，TMAO)是由膽堿、甜菜堿和肉毒堿等產生的代謝物，同時也是人類心臟或腎臟疾病的關鍵生物標志物，近期研究表明其也可以被用于結直腸癌的輔助診斷指標。TMAO通過影響膽固醇在人體器官的新陳代謝對心血管產生影響，是中風、動脈硬化、冠狀動脈疾病和心臟衰竭潛在的風險指示物。近期有報道稱空腹血液TMAO水平與多種心血管疾病的長期風險疾病之間也存在直接相關性，體內TMAO濃度越高(例如高于5mg/L)，患心血管疾病風險越大。因此，用于快速定量人血清或尿液TMAO的方法有著極大的市場需求。

目前，定量TMAO的常用方法是氣相色譜-質譜聯用儀(Gas Chromatography-MassSpectrometer，GC-MS)或液相色譜-質譜聯用(liquid Chromatograph MassSpectrometer，LC-MS)與核磁共振(nuclear magnetic resonance，NMR)技術，然而這些方法需要昂貴的儀器、復雜的操作且分析時間較長(30min甚至更長時間)。近期有報道稱可以通過一種利用TMAO還原酶將TMAO還原為三甲胺(trimethylamine，TMA)的酶促方法，通過離子色譜法量化TMA蒸氣，進而測得TMAO含量。或者用苦味酸法，將TMAO用還原劑還原為TMA，通過測量TMA來測定TMAO。然而，這些方法都是先將TMAO全部還原成三甲胺(TMA)，然后通過TMA的量換算出TMAO的含量，實驗過程都比較復雜，因此，所需試劑多，且易引起TMA氣體的外逸，造成實驗結果的偏差過大。由于這些方法操作復雜，檢測效率低且設備便攜性差，因此應用范圍受到了一定的限制，尤其無法適用于快速判斷結果的診斷服務。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是：提供一種操作簡便且檢測效率高的尿液中氧化三甲胺快速檢測試劑盒。

為了解決上述技術問題，本發明采用的技術方案為：一種尿液中氧化三甲胺快速檢測方法，包括以下步驟：

調節尿液pH，加入雷氏鹽，搖勻后反應，通過比色分析法或吸光光度法確定尿液中TMAO的含量。

進一步地，所述檢測方法還包括在進行尿液的pH值調節前，先用生石灰對尿液進行預處理。進一步地，向所述尿液中加入生石灰前，對所述尿液的進行pH值測試，若pH值小于7，則將尿液的pH值調節至7以上。

優選地，所述尿液加入生石灰處理后，離心取尿液上清，調節上清pH值至1～2后，加入雷氏鹽溶液，搖勻后置于0-4℃反應5-10min后，通過比色分析法或吸光光度法確定尿液中TMAO的含量。

優選地，所述尿液為檢測前收集新鮮尿液，優選地，所述尿液的溫度為25～40℃，更優選為37.5℃。

優選地，所述尿液中生石灰的加入量為每10ml尿液中加入0.9～1.6g生石灰。

本發明的有益效果在于：本發明方案采用雷氏鹽直接檢測尿液中的TMAO含量，由于TMAO直接與雷氏鹽反應后會顯色吸光度差異明顯，因此，既可通過肉眼觀察實現快速半定量判定，又可通過吸光光度法對TMAO進行準確定量，操作簡便。

本發明還包括一種尿液中氧化三甲胺快速檢測試劑盒，所述試劑盒包括顯色試劑，所述顯色試劑中包含有雷氏鹽。