[發明專利]一種幽門螺桿菌分型檢測用檢測試劑卡及其制備方法

有效

• 申請號: 201811130107.2
• 申請日: 2018-09-27
• 公開（公告）號: CN108956989B
• 公開（公告）日: 2021-08-13
• 發明（設計）人: 張念林;趙亞麗;孫嬋;馬丹丹;左云國
• 申請（專利權）人: 重慶新賽亞生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569
• 代理公司: 蘇州創元專利商標事務所有限公司 32103
• 代理人: 汪青;周敏

本發明涉及一種幽門螺桿菌分型檢測用檢測試劑卡，其包括樣品墊、量子墊、硝酸纖維素膜、吸水紙和襯板，量子墊上包被有量子點微球標記的抗原復合物，抗原復合物包括Urease抗原、CagA抗原、VacA抗原和鼠IgG；硝酸纖維素膜上設置有第一檢測線、第二檢測線、第三檢測線和質控線，第一檢測線上包被有VacA抗原，第二檢測線上包被有CagA抗原，第三檢測線上包被有Urease抗原，質控線上包被有羊抗鼠IgG。本發明提供的用于檢測幽門螺桿菌分型的檢測試劑卡，能夠快速、準確的得到結果，且能夠根據檢測結果能夠判斷幽門螺桿菌的感染類型，進而為臨床上的相關疾病提供輔助診斷。

技術領域

本發明屬于醫學免疫學中量子點免疫熒光層析技術領域，具體涉及一種幽門螺桿菌分型檢測用檢測試劑卡及其制備方法。

背景技術

流行病學研究顯示，幽門螺桿菌(HP)感染率非常高，全球大約50％的人都攜帶有HP，其已被國際癌癥組織確認為胃潰瘍、慢性胃炎和胃癌等胃部疾病最主要的致病因子。發病率的高低與社會經濟水平，人口密集程度，公共衛生條件以及水源供應有較密切的關系。流行病學研究顯示，HP感染多發生于兒童時期，在缺少抗生素治療情況下，HP感染通常伴隨終生；兒童感染菌株的基因型不受環境遷移而改變，常與父母感染的HP基因型一致。此外，HP感染也是成年人中最廣泛的慢性細菌感染，且感染率隨年齡增加而上升。中國自然人群HP感染率調查表明：21個省52個地區，累計檢測人數25209，HP感染率從34.52％～80.55％，多數地區人群感染率在50％左右，平均感染率為58.07％，胃癌高發區人群HP感染率總體水平高于低發區人群，感染年齡早于發達國家20年左右，20歲～40歲感染率為45.4％～63.6％，70歲以上高達78.9％。

研究證實，HP可以誘發慢性萎縮性炎癥改變，進而胃泌素分泌增加，環氧化酶-2(COX-2)和前列腺素(PGE)表達量上升，引起胃粘膜細胞形態和功能改變，導致慢性胃炎、胃潰瘍、十二指腸潰瘍、胃癌及胃粘膜相關淋巴瘤等胃腸道疾病的發生。HP感染明顯增加了發生十二指腸和胃潰瘍的危險性，大約1/6幽門螺桿菌感染者可能發生消化性潰瘍病；HP感染還使患胃癌的危險增加了2.7～12倍，有5％的B型萎縮性胃炎病人可發展為胃癌。隨著研究的深入，人們發現HP感染在非消化道疾病，如缺鐵性貧血、特發性血小板減少性紫癜、肝膽管疾病、心血管病、糖尿病、慢性阻塞性肺疾病等的發生發展中也同樣發揮重要作用。

幽門螺桿菌是革蘭氏陰性菌，菌體呈螺旋形彎曲，故稱幽門螺桿菌。幽門螺桿菌生存于胃部及十二指腸的各區域內，它會引起胃黏膜輕微的慢性發炎，甚或導致胃及十二指腸潰瘍與胃癌。幽門螺桿菌是人胃內唯一能夠產生大量尿毒酶的細菌，故可通過檢測尿毒酶來診斷HP感染。1994年，國際癌癥研究署將HP感染定為I類致癌物質，可致癌HP主要含有兩種細胞毒素：一種是細胞毒素相關蛋白CagA，一種是空泡細胞毒素VacA。根據是否表達CagA和VacA將HP分為兩種類型：I型為致病性較強的產毒菌株(CagA和VacA均表達，或表達其中一種)，II型為毒性較弱的不產毒菌株(CagA和VacA均不表達)。

自1983年通過胃鏡取活檢標本分離培養成功以來，對HP感染的診斷已發展出了許多方法，如免疫學、細菌學、病理學、血清學、同位素示蹤、分子生物學等。從標本采集角度可以分為侵入性和非侵入性兩大類。侵入性方法主要指必須通過胃鏡取活檢標本檢查的方法，包括細菌的分離培養和直接涂片、快速尿素酶試驗、熒光PCR(TaqMan探針)等。非侵入性方法主要指不通過胃鏡取活檢標本診斷HP的方法，包括同位素示蹤法、免疫學方法(抗原、抗體檢測)等。檢測方法雖然多種，但簡便、快速還能檢測分型的卻微乎其微。

量子點微球具有較好的生物相同性，其中量子點載體可以是聚苯乙烯、聚甲基丙烯酸甲酯、聚丁二烯等，而目前非常理想的熒光材料載體是聚苯乙烯，其具有易合成、表面易修飾有機官能團及反應活性高等優點。形成的量子點聚苯乙烯微球疏水、堅硬、不可生物降解、不被一般溶劑溶解或溶脹，具有比表面積大、吸附性強、凝結作用大及表面反應能力強等特性。