[發(fā)明專(zhuān)利]制備人絨毛膜干細(xì)胞培養(yǎng)液的方法及其應(yīng)用

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201811128285.1
• 申請(qǐng)日: 2018-09-27
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN109234228A
• 公開(kāi)（公告）日: 2019-01-18
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 魏色東
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 深圳市喬水生物科技有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): C12N5/0775
• 分類(lèi)號(hào): C12N5/0775;A61K8/99;A61K8/9794;A61Q19/00
• 代理公司: 廣州三環(huán)專(zhuān)利商標(biāo)代理有限公司 44202
• 代理人: 肖宇揚(yáng);付靜

1.一種制備人絨毛膜干細(xì)胞培養(yǎng)液的方法，包括以下步驟：

步驟a.使用0.25vol％胰酶消化處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的JEG-3人絨毛膜細(xì)胞系；

步驟b.移除胰酶消化液終止消化，利用無(wú)血清懸浮培養(yǎng)法富集含有所述JEG-3人絨毛膜細(xì)胞系的細(xì)胞懸液中的人絨毛膜干細(xì)胞，獲得JEG-3懸浮細(xì)胞球懸液；

步驟c.利用0.05％胰酶和0.02％EDTA對(duì)所述JEG-3懸浮細(xì)胞球懸液進(jìn)行消化，終止消化后，加入干細(xì)胞培養(yǎng)基傳代培養(yǎng)，傳代培養(yǎng)過(guò)程中提供2～4Gy劑量鈷⁶⁰γ射線照射，照射劑量率為165.44cGy/min，并加入基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1α，獲得人絨毛膜干細(xì)胞培養(yǎng)物；

步驟d.將所述人絨毛膜干細(xì)胞培養(yǎng)物離心，過(guò)濾，除去人絨毛膜干細(xì)胞，得到濾液即為所述人絨毛膜干細(xì)胞培養(yǎng)液。

2.如權(quán)利要求1所述制備人絨毛膜干細(xì)胞培養(yǎng)液的方法，其特征在于：在所述步驟c的培養(yǎng)過(guò)程中加入0.2mg/L基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1α。

3.如權(quán)利要求1所述制備人絨毛膜干細(xì)胞培養(yǎng)液的方法，其特征在于：在所述步驟c中，提供4Gy劑量的鈷⁶⁰γ射線照射。

4.采用如權(quán)利要求1～3任一項(xiàng)所述的方法制備的人絨毛膜干細(xì)胞培養(yǎng)液。

5.如權(quán)利要求4所述人絨毛膜干細(xì)胞培養(yǎng)液在護(hù)膚美容用品中的應(yīng)用。

6.一種護(hù)膚美容用品，其特征在于：含有如權(quán)利要求4所述的人絨毛膜干細(xì)胞培養(yǎng)液。

7.如權(quán)利要求6所述的護(hù)膚美容用品，其特征在于：所述護(hù)膚美容用品包括清潔類(lèi)產(chǎn)品、美白除皺類(lèi)產(chǎn)品以及化妝類(lèi)產(chǎn)品。

8.如權(quán)利要求7所述的護(hù)膚美容用品，其特征在于：

所述清潔類(lèi)產(chǎn)品包括洗手液、沐浴產(chǎn)品、洗發(fā)護(hù)發(fā)產(chǎn)品、潔面產(chǎn)品和卸妝產(chǎn)品；

所述美白除皺類(lèi)產(chǎn)品包括：潤(rùn)膚霜、爽膚水、收縮水、化妝水、乳液、日霜、晚霜、精華液、眼霜、護(hù)手霜、防裂膏、營(yíng)養(yǎng)液；

所述化妝類(lèi)產(chǎn)品包括：妝前乳、隔離霜、粉底霜、唇膏、胭脂、花露水、香粉和面膜。

9.如權(quán)利要求8所述的護(hù)膚美容用品，其特征在于，所述護(hù)膚美容用品為修復(fù)營(yíng)養(yǎng)液，除了水分，其含有重量百分比為50～75％的所述人絨毛膜干細(xì)胞培養(yǎng)液，且還含有如下重量百分比組分：