[發明專利]一種埃博霉素的膜提取分離工藝在審
| 申請號: | 201811121591.2 | 申請日: | 2018-09-26 |
| 公開(公告)號: | CN108912131A | 公開(公告)日: | 2018-11-30 |
| 發明(設計)人: | 虞龍 | 申請(專利權)人: | 湖州鼎海生物科技有限公司 |
| 主分類號: | C07D491/044 | 分類號: | C07D491/044 |
| 代理公司: | 南京匯恒知識產權代理事務所(普通合伙) 32282 | 代理人: | 王月霞 |
| 地址: | 313112 浙江*** | 國省代碼: | 浙江;33 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 洗脫液 有機膜 截留分子量 埃博霉素a 陶瓷膜過濾 埃博霉素 分段收集 分離工藝 過濾液 膜提取 濃縮液 洗脫 正相硅膠色譜 納濾膜濃縮 凝膠色譜柱 低溫結晶 有機溶劑 正相色譜 發酵液 納濾膜 陶瓷膜 過濾 | ||
1.一種埃博霉素的膜提取分離工藝,其特征在于包括以下步驟:
1)將埃博霉素發酵液經過有機膜過濾,得到有機膜過濾液,再以過濾液20%體積量的蒸餾水進行清洗,合并有機膜過濾液和洗液,再經陶瓷膜過濾后得到陶瓷膜過濾液;再以過濾液10%體積量的蒸餾水進行清洗,膜工作溫度為25~40℃,壓力為0.05Mpa~0.3Mpa;
2)將步驟1)得到的陶瓷膜過濾液和洗液上凝膠色譜柱洗脫,HPLC檢測洗脫液,收集埃博霉素a和b的總色譜純度達到80%以上的流分,收集到的洗脫液再經納濾膜濃縮,得到納濾濃縮液后,將濃縮液經過正相硅膠色譜洗脫,HPLC檢測洗脫液,收集埃博霉素a和b色譜純度各達到95%以上的流分,將分別收集到的洗脫液低溫結晶后分別得到埃博霉素a和b的結晶;膜工作溫度為25~40℃,壓力為0.05Mpa~0.3Mpa;所述正相硅膠色譜柱中添加有分子印跡聚合物。
2.根據權利要求1所述的一種埃博霉素的膜提取分離工藝,其特征在于:步驟1)中所述有機膜規格為5000~6000截留分子量。
3.根據權利要求1所述的一種埃博霉素的膜提取分離工藝,其特征在于:步驟1)中所述陶瓷膜規格為1000~1500截留分子量。
4.根據權利要求1所述的一種埃博霉素的膜提取分離工藝,其特征在于:步驟1)中所述蒸餾水清洗流程為每次添加過濾液5%體積量的洗液進行容器和膜的潤洗。
5.根據權利要求1所述的一種埃博霉素的膜提取分離工藝,其特征在于:步驟2)中所述凝膠色譜柱為SephadexG-15。
6.根據權利要求1所述的一種埃博霉素的膜提取分離工藝,其特征在于:步驟2)中所述凝膠色譜洗脫的洗脫液為:丙酮與石油醚按體積比為1:1~7配置而成。
7.根據權利要求1所述的一種埃博霉素的膜提取分離工藝,其特征在于:步驟2)中所述納濾膜為500~800截留分子量。
8.根據權利要求1所述的一種埃博霉素的膜提取分離工藝,其特征在于:步驟2)中所述正相凝膠色譜的硅膠用量與濃縮液量的質量比為5-10 :1。
9.根據權利要求1所述的一種埃博霉素的膜提取分離工藝,其特征在于:步驟2)中所述正相硅膠色譜洗脫的洗脫液為:丙酮與石油醚按體積比為1:1~6配置而成。
10.根據權利要求1所述的一種埃博霉素的膜提取分離工藝,其特征在于:步驟2)中所述低溫結晶溫度為-30℃~-10℃。
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