[發明專利]大腸埃希氏菌ACThr1032及其在發酵生產L-蘇氨酸中的應用

有效

• 申請號: 201811115020.8
• 申請日: 2018-09-25
• 公開（公告）號: CN109266578B
• 公開（公告）日: 2020-06-23
• 發明（設計）人: 周旭波;王健;方培新;王華萱;何亞章
• 申請（專利權）人: 江蘇澳創生物科技有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12P13/08;C12R1/19
• 代理公司: 無錫市大為專利商標事務所(普通合伙) 32104
• 代理人: 殷紅梅;張仕婷

1.一株大腸埃希氏菌ACThr1032，已保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心（CGMCC），其分類命名為大腸埃希氏菌（Escherichia coli），保藏編號為CGMCCNo.16144，保藏日期為2018年7月23日。

2.權利要求1所述大腸埃希氏菌ACThr1032的應用，其特征是：將其應用于發酵生產L-蘇氨酸。

3.如權利要求2所述大腸埃希氏菌ACThr1032的應用，其特征是步驟如下：

（1）菌種培養：將種子培養基進行滅菌，冷卻至30~40℃，pH調至6.5~7.5，將大腸埃希氏菌ACThr1032菌種接至種子培養基中進行培養，培養至對數生長期；

（2）發酵培養：將發酵培養基進行滅菌，冷卻至37℃，pH調至7.0；將步驟（1）制得的對數生長期菌種接入發酵培養基中進行發酵培養以制取L-蘇氨酸發酵液；培養30~50h，即得到L-蘇氨酸發酵液；

（3）提取純化：將步驟（2）得到的L-蘇氨酸發酵液通過膜過濾去除菌體得到過濾清液，將過濾清液進行蒸發濃縮結晶，然后降溫冷卻結晶，進一步離心去除母液，得到濕晶，將濕晶進行干燥，得到L-蘇氨酸晶體。

4.如權利要求3所述大腸埃希氏菌ACThr1032的應用，其特征是：步驟（1）中所述菌種培養條件為溫度30~40℃、pH值6.5~7.5、溶氧≥30%和罐壓0.02~0.05 MPa。

5.如權利要求3所述大腸埃希氏菌ACThr1032的應用，其特征是：步驟（2）中所述發酵培養條件為溫度30~40℃、pH值6.5~7.5、溶氧≥30%和罐壓0.02~0.10 MPa。

6.如權利要求5所述大腸埃希氏菌ACThr1032的應用，其特征是：步驟（2）中通風量及攪拌轉數根據溶氧數據交替階梯提高，發酵過程中殘糖含量控制在0.05%~0.2%。

7.如權利要求3所述大腸埃希氏菌ACThr1032的應用，其特征是：

步驟（1）所述菌種培養的培養基包含葡萄糖5~15g/L、玉米漿15~35g/L、硫酸銨0.5~4g/L、磷酸二氫鉀0.5~4g/L、硫酸鎂0.05~1g/L、酵母粉0.5~10g/L、微量元素1份；

步驟（2）所述發酵培養的培養基包含葡萄糖5~40g/L、玉米漿15~40g/L、硫酸銨0.5~5g/L、磷酸0.5~4g/L、硫酸鎂0.05~2g/L、氯化鉀0.05~3g/L、糖蜜0.5~10g/L、微量元素1份。

8.如權利要求3所述大腸埃希氏菌ACThr1032的應用，其特征是：步驟（3）中提取純化的具體設備及控制參數如下：膜過濾設備為陶瓷膜、有機膜或金屬膜，孔徑為8~100nm；蒸發濃縮結晶設備為單效或多效蒸發結晶器，蒸發溫度為50~85℃，濃縮比為3~8倍；冷卻結晶設備為冷結晶器，降溫控制速度為2~5℃/h，最低溫度為5~15℃；離心機為平板刮刀式離心機，離心后濕晶含水量≤10%。