[發(fā)明專利]一株新淺綠色氣球菌噬菌體AVP及其用途

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201811112720.1
• 申請(qǐng)日: 2018-09-25
• 公開（公告）號(hào): CN109266621B
• 公開（公告）日: 2021-06-01
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 韓文瑜;顧敬敏;襲恒豫;程夢(mèng)珺
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 吉林大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N7/00
• 分類號(hào): C12N7/00;A61K35/76;A61P31/04;A23K10/18;A01N63/40;A01P1/00;C12R1/92
• 代理公司: 吉林長(zhǎng)春新紀(jì)元專利代理有限責(zé)任公司 22100
• 代理人: 陳宏偉

本發(fā)明提供一株新淺綠色氣球菌噬菌體AVP，保藏于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏編號(hào)為：CCTCC NO:M 2018155；保藏時(shí)間為：2018年3月25日；新淺綠色氣球菌噬菌體AVP能裂解淺綠色氣球菌的噬菌體AVP裂解液，該噬菌體具有較寬的裂解譜，不僅可以裂解淺綠色氣球菌，也可以裂解金黃色葡萄球菌和表皮葡萄球菌，既可以裂解標(biāo)準(zhǔn)菌株，也可以裂解從環(huán)境中或者發(fā)病動(dòng)物糞便中分離的臨床株，可以單獨(dú)或與其他物質(zhì)復(fù)配使用，為消毒凈化環(huán)境提供一種安全、無毒的噬菌體消殺產(chǎn)品。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種從自然界分離的感染和殺死淺綠色氣球菌的噬菌體，進(jìn)一步講是公開了一株新淺綠色氣球菌噬菌體AVP，同時(shí)還提供了其用途，及使用該噬菌體裂解液作為活性成分的組合物用來裂解淺綠色氣球菌和葡萄球菌的方法，屬于微生物技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

淺綠色氣球菌 (Aeroeoccus viridans)歸于鏈球菌科(Strep)，氣球菌屬(Aerococcus), 是氣球菌屬的模式種，1953年由 WILLIAMS等正式命名。是一種介于葡萄球菌與鏈球菌之間的細(xì)菌，而更接近于后者。與葡萄球菌和腸球菌相似之處是其能在6.5%氯化鈉肉湯中生長(zhǎng)，但其觸酶陰性、菌落小、α-溶血等更接近于鏈球菌。

該菌為條件性致病菌 ，廣泛分布于自然界，一般情況下不致病。在機(jī)體免疫功能低下或免疫功能不健全等情況下可引起嚴(yán)重感染。如心內(nèi)膜炎、尿道感染、菌血癥、敗血癥、腦膜炎和膿毒性關(guān)節(jié)炎等，淺綠色氣球菌是近年來被重視的伺機(jī)病原菌。

近年來，由于免疫抑制劑的廣泛應(yīng)用、侵入性治療機(jī)會(huì)的增加以及臨床抗菌藥物濫用等因素，人醫(yī)臨床上綠色氣球菌所致感染的報(bào)道不斷增多。此外，該菌在水產(chǎn)養(yǎng)殖中能夠造成龍蝦、羅非魚等魚蝦類感染，給養(yǎng)殖業(yè)造成巨大經(jīng)濟(jì)損失。在獸醫(yī)臨床上，相關(guān)病例也層出不窮，可引起仔豬下俐、豬的呼吸系統(tǒng)疾病、關(guān)節(jié)炎、敗血癥、腦膜炎及牛的亞臨床乳腺炎等。

噬菌體是一種殺滅細(xì)菌的病毒，寄生于細(xì)菌并利用細(xì)菌來復(fù)制繁殖，最后將細(xì)菌裂解死亡，由于其天然的殺菌特性，而被科學(xué)家認(rèn)為是潛在的“超級(jí)細(xì)菌的有效克星”，而噬菌體對(duì)宿主細(xì)菌的特異性高、強(qiáng)大的裂解能力以及對(duì)人類和動(dòng)物（產(chǎn)品）沒有毒副作用、不會(huì)產(chǎn)生藥物殘留等優(yōu)勢(shì)而顯示出了比抗生素更加廣闊的應(yīng)用前景和價(jià)值。早在1917年，法裔加拿大微生物學(xué)家Felixd Herelle首次發(fā)現(xiàn)噬菌體后，科學(xué)界就一直嘗試將其用于治療人或動(dòng)物的細(xì)菌性感染；2013年2月由美國(guó)Intralytix公司研發(fā)的針對(duì)沙門菌的噬菌體制劑SalmoFreshTM被美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局(FDA)認(rèn)定為公認(rèn)安全級(jí)產(chǎn)品(GRAS)，并獲批準(zhǔn)上市。

然而，大多數(shù)噬菌體生物控制研究集中在大腸桿菌、李斯特氏菌、金黃色葡萄球菌和梭菌的控制上，而針對(duì)淺綠色氣球菌能夠進(jìn)行特異性防治的噬菌體目前尚未見報(bào)道。因此，開發(fā)新型對(duì)淺綠色氣球菌具有防治效果的噬菌體具有十分重要的意義。

發(fā)明內(nèi)容

針對(duì)上述問題，本發(fā)明提供一株新淺綠色氣球菌噬菌體AVP，能裂解淺綠色氣球菌的噬菌體AVP裂解液，該噬菌體具有較寬的裂解譜，不僅可以裂解淺綠色氣球菌，也可以裂解金黃色葡萄球菌和表皮葡萄球菌，既可以裂解標(biāo)準(zhǔn)菌株，也可以裂解從環(huán)境中或者發(fā)病動(dòng)物糞便中分離的臨床株，可以單獨(dú)或與其他物質(zhì)復(fù)配使用，為消毒凈化環(huán)境提供一種安全、無毒的噬菌體消殺產(chǎn)品。

本發(fā)明公開的一株新淺綠色氣球菌噬菌體AVP，保藏于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏編號(hào)為：CCTCC NO: M 2018155；保藏時(shí)間為：2018年3月25日。該噬菌體具有呈正二十面體的頭部和可伸縮的尾部；噬菌體在1.5%的BHI瓊脂培養(yǎng)基上可以形成透亮空斑，周圍無暈環(huán)，邊緣清晰規(guī)則，直徑為0.1-1mm；基因組核酸的酶切圖譜顯示該噬菌體核酸是雙鏈DNA（dsDNA）；根據(jù)國(guó)際病毒分類委員會(huì)(ICTV)2005年發(fā)表的《病毒分類—國(guó)際病毒分類委員會(huì)第八次報(bào)告》，AVP屬于肌尾病毒科（Myoviridae）。