[發(fā)明專利]一種微萃取-毛細管電泳聯(lián)用測定群體感應(yīng)信號分子的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201811105958.1
• 申請日: 2018-09-21
• 公開（公告）號: CN109374760B
• 公開（公告）日: 2023-01-10
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 岳美娥;藺巧燕
• 申請（專利權(quán)）人: 青島科技大學(xué)
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/16
• 代理公司: 青島中天匯智知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 37241
• 代理人: 郝團代

一種微萃取?毛細管電泳聯(lián)用測定群體感應(yīng)信號分子的方法,將萃取劑和分散劑快速注入含有群體感應(yīng)信號分子的水溶液中，形成微乳液。一段時間后，加入破乳劑破壞微乳液，離心使攜帶群體感應(yīng)信號分子的萃取劑沉降到容器底部。取出萃取劑，氮氣吹干，定容，利用毛細管電泳進行進樣分析。利用離線液液分散微萃取和在線的場放大進樣兩步富集，實現(xiàn)了群體感應(yīng)信號分子的高靈敏檢測。依靠這種方法，群體感應(yīng)信號分子的的檢測限低于5.0 ng/mL，可滿足于魚肉等真實樣品中群體感應(yīng)信號分子的的檢測。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于分析化學(xué)和高靈敏度檢測領(lǐng)域，涉及一種微萃取-毛細管電泳聯(lián)用測定群體感應(yīng)信號分子的方法建立和應(yīng)用。

背景技術(shù)

食品腐敗是一個復(fù)雜的過程，其中微生物作用是引起食品腐敗變質(zhì)的主要因素之一。微生物通過分解蛋白質(zhì)、脂質(zhì)及糖類等營養(yǎng)物質(zhì)進行生長繁殖，進而導(dǎo)致食品腐敗，從而導(dǎo)致巨大的經(jīng)濟損失和嚴重的公共衛(wèi)生問題（Gram L., Ravn L., Rasch M. J. FoodMicrobio., 2002, 78: 79-97）。群體感應(yīng)(quorum sensing，QS)是細菌根據(jù)自身細菌濃度變化進行自我協(xié)調(diào)的一種群體行為，即細菌在生長繁殖過程中通過合成、分泌自誘導(dǎo)物作為信號分子，檢測細菌濃度；當(dāng)自誘導(dǎo)物濃度隨著細菌群體密度達到一定閾值時，細菌便開啟細胞密度依賴的特定基因表達機制（Bassler B.L., Greenberg E.P., Stevens A.M.J. bacteriology, 1997, 179: 4043-4045）。現(xiàn)有研究表明QS通過調(diào)控與食品腐敗相關(guān)的蛋白質(zhì)、脂肪、果膠、殼多糖等分解酶的活性導(dǎo)致食品腐敗，研究人員已在不同的腐敗食品中檢測出了不同類型的QS信號分子（張彩麗，朱素琴，汪映，孫秀嬌，曾名湧。生物技術(shù)通報，2014，150-155）。基于此，近年來信號分子介導(dǎo)的QS現(xiàn)象如何影響食品的品質(zhì)以及與食品腐敗的關(guān)系成為食品防腐保鮮領(lǐng)域的一個新的研究熱點。但與QS在醫(yī)療、制藥和生物防御等方面取得的顯著進展相比，其在食品科學(xué)研究領(lǐng)域中仍然處于起步階段。因此，建立QS信號分子及其抑制劑的快速高靈敏的檢測新方法，有助于深入研究QS信號分子的產(chǎn)生及其對食品腐敗的影響，對構(gòu)建以干擾腐敗細菌QS系統(tǒng)作為新靶點的食品防腐保鮮策略，保證人民的食品安全具有重要意義。