[發(fā)明專利]一種檢測β-半乳糖苷酶的熒光探針在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201811098563.3 | 申請日： | 2018-09-20 |
| 公開（公告）號： | CN109180744A | 公開（公告）日： | 2019-01-11 |
| 發(fā)明（設計）人： | 林偉英;李子紅;任明光 | 申請（專利權）人： | 濟南大學 |
| 主分類號： | C07H1/00 | 分類號： | C07H1/00;C07H17/04;C09K11/06;G01N21/64 |
| 代理公司： | 濟南泉城專利商標事務所 37218 | 代理人： | 李桂存 |
| 地址： | 250022 山東*** | 國省代碼： | 山東;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 半乳糖苷酶 熒光探針 種檢測 生物分子檢測 水溶液中和 特異性檢測 細胞 傳感檢測 指示劑 專一性 探針 應用 靈敏 | ||
1.一種檢測β-半乳糖苷酶的熒光探針，其結構式如式（I）所示：
式（I）。
2.一種如權利要求1所述的熒光探針的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：
（1）4-三氨基酮酸和1,6-二羥基萘在三氟乙酸中，加熱回流反應，蒸除溶劑得化合物1：
；
（2）β-D-半乳糖五乙酸酯與HBr在乙酸中室溫反應，產(chǎn)物分離純化得化合物2：
；
（3）化合物1與化合物2在Na2SO4和Cs2CO3存在下于乙腈中加熱反應，產(chǎn)物分離純化得化合物3：
；
（4）化合物3與甲醇鈉在甲醇中室溫反應，產(chǎn)物分離純化得熒光探針：
。
3.根據(jù)權利要求2所述的制備方法，其特征在于，步驟（1）中，反應溫度為75℃，反應時間為12h；步驟（2）中反應時間為1h；步驟（3）中，反應溫度為60℃，反應時間為24h；步驟（4）中，反應時間為4h。
4.根據(jù)權利要求2所述的制備方法，其特征在于，步驟（2）中，分離純化步驟為：產(chǎn)物加入等體積的二氯甲烷和冰，分層后水相用二氯甲烷萃取，有機層以NaHCO3和飽和食鹽水分別洗滌，再以無水硫酸鈉干燥，蒸除溶劑。
5.根據(jù)權利要求2所述的制備方法，其特征在于，步驟（3）中，分離純化步驟為：產(chǎn)物蒸除溶劑得粗產(chǎn)品，再用硅膠柱進行分離，硅膠顆粒大小為200-300目，洗脫劑為乙酸乙酯/石油醚=1:2（v/v）。
6.根據(jù)權利要求2所述的制備方法，其特征在于，步驟（4）中，分離純化步驟為：產(chǎn)物蒸除溶劑得粗產(chǎn)品，再用硅膠柱進行分離，硅膠顆粒大小為200-300目，洗脫劑為二氯甲烷/甲醇=10:1（v/v）。
7.一種如權利要求1所述的熒光探針檢測溶液或活細胞中β-半乳糖苷酶的應用。
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