[發(fā)明專利]一株枯草芽孢桿菌及其應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201811098313.X
• 申請(qǐng)日: 2018-09-20
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN109161506A
• 公開(kāi)（公告）日: 2019-01-08
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 牛兆穎;牛贍光;張俊生;張淑靜
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 寧國(guó)市百立德生物科技有限公司
• 主分類號(hào): C12N1/20
• 分類號(hào): C12N1/20;A01N63/00;A01P5/00;C12R1/125
• 代理公司: 合肥匯融專利代理有限公司 34141
• 代理人: 趙宗海

本發(fā)明公開(kāi)了一株枯草芽孢桿菌及其應(yīng)用，涉及生物防治植物病害領(lǐng)域。該菌株為枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)Yt1004，保藏編號(hào)為CGMCC No.14672。本發(fā)明還公開(kāi)了含有上述菌株的生物防治制劑及其制備方法。該微生物制劑可以作為生物農(nóng)藥或生物肥料防治作物根結(jié)線蟲病害，包括黃瓜根結(jié)線蟲、西紅柿根結(jié)線蟲、大姜根結(jié)線蟲、甜瓜根結(jié)線蟲等一種或幾種。本發(fā)明的枯草芽孢桿菌菌株Yt1004具有直徑長(zhǎng)、耐低氧、作用譜廣、適應(yīng)性強(qiáng)，在低營(yíng)養(yǎng)下即可快速生長(zhǎng)繁殖等特點(diǎn)，因此具有良好的應(yīng)用前景。由該菌株制備的生物防治制劑，不僅能夠高效的防治植物根結(jié)線蟲病害，還能有效提高作物產(chǎn)量，是一種極具應(yīng)用前景的生物防治制。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物防治植物病害領(lǐng)域，具體涉及一株枯草芽孢桿菌及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

植物病害是植物在生物或非生物因子的影響下，發(fā)生一系列形態(tài)、生理和生化上的病理變化，阻礙了正常生長(zhǎng)、發(fā)育的進(jìn)程，從而影響人類經(jīng)濟(jì)效益的現(xiàn)象。目前對(duì)于植物病害的防治，常規(guī)采用的方法包括傳統(tǒng)的化學(xué)防治、培育抗病品種以及生物防治。抗病品種培育周期長(zhǎng)，抗性單一，而化學(xué)防治，極易造成農(nóng)藥殘留，環(huán)境污染；同時(shí)，化學(xué)農(nóng)藥的長(zhǎng)期使用，使得病原菌對(duì)其產(chǎn)生抗藥性，導(dǎo)致防效下降甚至失敗。因此，利用有益微生物防治植物病害具有廣闊的前景。

芽孢桿菌(Bacillus)，在分類上是細(xì)菌的一個(gè)科，能形成芽孢(內(nèi)生孢子)的桿菌或球菌。包括芽孢桿菌屬、芽孢乳桿菌屬、梭菌屬、脫硫腸狀菌屬和芽孢八疊球菌屬等。形成芽孢后，它們對(duì)外界有害因子抵抗力強(qiáng)，分布廣，存在于土壤、水、空氣以及動(dòng)物腸道等處。由于它們代謝快、繁殖快，四小時(shí)增殖10萬(wàn)倍；生命力強(qiáng)，耐受性好；體積大，占據(jù)空間優(yōu)勢(shì)，抑制有害菌的生長(zhǎng)繁殖等優(yōu)勢(shì)而備受矚目。芽孢桿菌是植物病害生防微生物的重要組成部分，可用于防治多種植物病害。芽孢桿菌作為生防菌防治植物病害的機(jī)制主要有：抗生作用、營(yíng)養(yǎng)競(jìng)爭(zhēng)、空間競(jìng)爭(zhēng)、重寄生作用以及誘導(dǎo)植物產(chǎn)生抗性等機(jī)制，芽孢桿菌的生防機(jī)制主要是以產(chǎn)生拮抗物質(zhì)抑制有害病菌的生長(zhǎng)或殺死病原菌。這些物質(zhì)絕大多數(shù)為肽類抗生素，具有高效、低殘留、與環(huán)境友好等優(yōu)點(diǎn)。

發(fā)明內(nèi)容

針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)不足，本發(fā)明提供一株枯草芽孢桿菌及其應(yīng)用，所述芽孢桿菌菌株具有直徑長(zhǎng)、耐低氧、作用譜廣、適應(yīng)性強(qiáng)，在低營(yíng)養(yǎng)下即可快速生長(zhǎng)繁殖等特點(diǎn)，因此具有良好的應(yīng)用前景。

為實(shí)現(xiàn)以上目的，本發(fā)明的技術(shù)方案通過(guò)以下技術(shù)方案予以實(shí)現(xiàn)：

本發(fā)明所提供的菌株為枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)Yt1004，是從山東省林業(yè)科學(xué)院苗圃中分離獲得的，已于2017年9月26日保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心(簡(jiǎn)稱CGMCC，地址：北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)，中國(guó)科學(xué)院微生物研究所)，保藏編號(hào)為CGMCC No.14672。其具有以下生物學(xué)特性：在牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基或LB培養(yǎng)基上菌落形態(tài)為圓形或不規(guī)則形，乳白色，表面粗糙，在牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基上，28℃下培養(yǎng)兩天后，鏡檢，菌體細(xì)胞呈桿狀，能運(yùn)動(dòng)。經(jīng)革蘭氏染色呈陽(yáng)性(以大腸桿菌為對(duì)照)。經(jīng)芽孢染色后觀察芽孢呈橢圓形或柱狀。

優(yōu)選的，所述枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)Yt1004及其制備的生物防治劑可用于防治植物根結(jié)線蟲病害。

優(yōu)選的，枯草芽孢桿菌的培養(yǎng)方法或繁殖方法包括以下步驟：

(1)普通培養(yǎng)保存采用LB培養(yǎng)基，配方為：胰蛋白胨10g，酵母提取物5g，氯化鈉10g，瓊脂15-20g，蒸餾水1000mL，pH調(diào)至7.1-7.4；

(2)實(shí)驗(yàn)室液體培養(yǎng)采用LB液體培養(yǎng)基，配方為：胰蛋白胨10g，酵母提取物5g，氯化鈉10g，蒸餾水1000mL，pH調(diào)至7.1-7.4；