[發明專利]含有微生物菌劑的泥鰍用飼料的制備方法

在審

• 申請號: 201811093226.5
• 申請日: 2018-09-19
• 公開（公告）號: CN109105667A
• 公開（公告）日: 2019-01-01
• 發明（設計）人: 孫弋博
• 申請（專利權）人: 浦江縣酉澤水產科技有限公司
• 主分類號: A23K50/80
• 分類號: A23K50/80;A23K20/147;A23K10/30;A23K10/22;A23K20/105;A23K20/111;A23K10/12;A23K10/14
• 代理公司: 北京國翰知識產權代理事務所(普通合伙) 11696
• 代理人: 衛翠婷

1.含有微生物菌劑的泥鰍用飼料的制備方法，其特征在于：將蛋白液、玉米粉、魚粉、秸稈粉復配成飼料；將飼料、微生物菌液和水攪拌混合，加入（Z）-3-己烯醇和4-羥基苯乙醇，將混合物置于發酵槽中好氧發酵，即得含有微生物菌劑的飼料。

2.根據權利要求1所述的含有微生物菌劑的泥鰍用飼料的制備方法，其特征在于：所述蛋白液制備步驟為：

1）將廢棄魚鱗洗凈，烘干，粉碎，用1-2％檸檬酸溶液浸泡24-36小時，間歇攪拌，浸泡完成后用去離子水沖洗至中性，過濾；然后用0.03-0.05％氫氧化鈉溶液浸泡24-36小時，間歇攪拌，浸泡完成后用去離子水沖洗至中性，過濾；

2）將預處理魚鱗置于0.05-0.08mol/L檸檬酸溶液體系中，加入底物重量0.3-0.5％的木瓜蛋白酶限制性酶解，控制溫度在5-10℃，超聲輔助酶解，持續低速攪拌下酶解24-48小時，沸水浴滅酶，將酶解液高速離心，取上清液，沉淀重復酶解操作2-3次，收集上清液；

3）上清液中加入質量百分比2.7-3.5％的枯草桿菌蛋白酶，調節pH為7.5-8.0，45-55℃恒溫下超聲輔助酶解，水解1.5-2小時后沸水浴滅酶，冷卻得酶解液；

4）將酶解液依次通過大孔吸附樹脂-陽離子交換樹脂-陰離子交換樹脂進行吸附，吸附后用洗脫液進行洗脫，然后收集提純液減壓濃縮，得蛋白液。

3.根據權利要求2所述的含有微生物菌劑的泥鰍用飼料的制備方法，其特征在于：所述超聲輔助酶解超聲頻率為50-60kHz，超聲聲強為0.4-0.5W/cm²。

4.根據權利要求2所述的含有微生物菌劑的泥鰍用飼料的制備方法，其特征在于：所述洗脫液為室溫下去離子水，流速為2-3BV/h。

5.根據權利要求1所述的含有微生物菌劑的泥鰍用飼料的制備方法，其特征在于：所述微生物菌液制備步驟為：將哈茨木霉、黑曲霉和李氏木霉分別置于馬鈴薯糖瓊脂培養基上進行斜面培養；將得到經斜面培養后的哈茨木霉、黑曲霉和李氏木霉接種于培養基進行擴繁，哈茨木霉、黑曲霉和李氏木霉種子瓶菌液按照體積比2:1-3∶2-4，以5-7％接種量接種發酵瓶混合培養得混合發酵菌液，并加入保護劑。

6.根據權利要求5所述的含有微生物菌劑的泥鰍用飼料的制備方法，其特征在于：所述保護劑為按照質量百分比脫脂乳8-10％、黃原膠5-6％、海藻糖2-4％、山梨醇0.6-1.2%和茶多酚0.001-0.003%。

7.根據權利要求1所述的含有微生物菌劑的泥鰍用飼料的制備方法，其特征在于：所述蛋白液、玉米粉、魚粉、秸稈粉按3-4:1.5-2.0:1.0-2.0:1的重量比復配成飼料；飼料、微生物菌液和水按重量比100-200:1-3:100-200混合。

8.根據權利要求1所述的含有微生物菌劑的泥鰍用飼料的制備方法，其特征在于：所述微生物菌液為稀釋成20-40%的菌液。

9.根據權利要求1所述的含有微生物菌劑的泥鰍用飼料的制備方法，其特征在于：所述（Z）-3-己烯醇和4-羥基苯乙醇的加入量為微生物菌劑固形物重量的0.001-0.003%和0.002-0.003%。

10.根據權利要求1所述的含有微生物菌劑的泥鰍用飼料的制備方法，其特征在于：所述飼料制備過程中發酵溫度為38-40℃，發酵20-24小時。