[發(fā)明專利]含靜脈瓣的生物源性靜脈的制備方法

有效

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• 申請日: 2018-09-18
• 公開（公告）號: CN109316631B
• 公開（公告）日: 2021-04-20
• 發(fā)明（設計）人: 曾祥軍
• 申請（專利權）人: 曾祥軍
• 主分類號: A61L27/34
• 分類號: A61L27/34;A61L27/36;A61L27/50;A61L27/54;A61L33/10
• 代理公司: 武漢開元知識產權代理有限公司 42104
• 代理人: 俞鴻;王虹

本發(fā)明公開了一種含靜脈瓣的生物源性靜脈的制備方法，其特征在于，步驟為：a、剪取直徑0.5～1.5cm，長3～5cm含有完整靜脈瓣的牛的頸靜脈，清理并消毒；b、對步驟a中得到的材料進行細胞裂解處理、細胞消化及核酸消化處理；c、將經過步驟b處理的材料依次進行共價鍵合肝素處理→離子結合肝素處理→共價鍵合肝素處理；d、將經過步驟c處理的材料浸入雷帕霉素溶液與PLGA的混合物并勻速拉動1～10分鐘，然后將靜脈內膜外翻同樣的步驟處理；自然晾干后放入20℃烘箱烘干12小時。本發(fā)明把雷帕霉素涂層到靜脈內膜和外膜，這樣處理的含靜脈瓣的牛頸靜脈植入狗靜脈后顯著抑制靜脈內膜及吻合口的增生。

技術領域

本發(fā)明涉及生物醫(yī)學工程，具體地指一種含靜脈瓣的生物源性靜脈的制備方法。

背景技術

下肢靜脈曲張是臨床上的常見病，易發(fā)于45歲以上的人群。患者早期很少出現明顯的臨床癥狀，但到后期則可能出現下肢淺靜脈顯露，伴酸、沉、脹、痛、易疲勞等癥狀，嚴重者可并發(fā)血栓性淺靜脈炎、瘀積性皮炎、瘀積性潰瘍、曲張靜脈團出血。下肢靜脈曲張的病因是靜脈瓣功能不全，導致下肢靜脈血液充盈，壓力高，從而靜脈曲張，靜脈曲張導致局部血液循環(huán)障礙并影響肢體外觀，目前治療下肢靜脈曲張最有效的方法是高位結扎和大隱靜脈剝離，這類方法都僅僅是對癥治療，無法恢復靜脈瓣的功能，沒有消除靜脈曲張的根本病因，并且對患者傷害大，術后患者恢復比較慢，復發(fā)率比較高，還會造成多個手術瘢痕的遺留。

生物材料在人體內表現出良好的生物相容性及血流動力學特征，公開號為CN105770991 A的中國發(fā)明專利公開了一種生物源性靜脈瓣膜的制備方法，但將制得的牛的頸靜脈管道植入狗后腔靜脈2周后吻合口處如圖1所示，超聲顯示吻合口直徑0.48厘米，靜脈內直徑0.69厘米，吻合口狹窄部位橫截面積/非吻合口橫截面積＝48.4％，吻合口增生導致吻合口橫截面積下降了51.6％；內膜處如圖2所示，超聲顯示增生處內徑0.53cm，其它處內徑0.7cm，橫截面積減少了43％，血管內膜顯著增生。吻合口及內膜的增生會阻擋血流，造成含靜脈瓣的牛頸靜脈狹窄，甚至閉塞的嚴重后果。因此，需要開發(fā)出一種異種植入后靜脈內膜及吻合口內膜增生受到明顯抑制的含有靜脈瓣膜的生物源性靜脈的制備方法。

雷帕霉素是一種高效的免疫抑制劑，臨床上多用于器官移植的抗排斥反應和自身免疫性疾病的治療，《局部應用雷帕霉素在預防移植靜脈再狹窄中的作用》(中國動脈硬化雜志；2006年11期)中公開了在已知血管外面局部應用雷帕霉素，可以在一定時間內抑制移植血管的的吻合口增生，從而降低靜脈移植術后的再狹窄發(fā)生率。但上述文獻的方法實驗對象是自體血管移植，不涉及免疫排斥反應，把牛的含靜脈瓣的靜脈移植到狗的靜脈屬于異種移植，異種之間產生更大的排斥反應，嚴重會導致靜脈及吻合口狹窄甚至閉塞，對抗免疫排斥反應要求更高，文獻中的方法無法滿足。文獻中處理方式是將雷帕霉素加入生物蛋白膠后注射在移植靜脈的周圍間隙，雷帕霉素被涂抹于血管外膜，雷帕霉素需要滲透過血管壁進入靜脈內膜來起到抑制靜脈內膜增生的作用，靜脈內膜中雷帕霉素的濃度無法得到保證，還有文獻中雷帕霉素是吻合口吻合完畢后使用，不同的手術者和不同的病人在使用量和具體位置有個體差異性，不利于保證效果的穩(wěn)定性，自體血管移植無法大規(guī)模批量生產，限制了推廣，自體血管的獲取對病人造成二次創(chuàng)傷不可忽視。因此，亟待開發(fā)出一種制備方法，使含有靜脈瓣的生物源性靜脈內膜上穩(wěn)定含有高濃度雷帕霉素，能夠更強抑制靜脈內膜和吻合口增生，即使異種植入后也能預防血管內膜和吻合口增生，避免靜脈狹窄和閉塞，而且能夠大規(guī)模推廣應用，同時保證穩(wěn)定的質量，更需要避免病人二次創(chuàng)傷。

發(fā)明內容

本發(fā)明的目的就是要解決上述背景技術的不足，提供一種異種植入后靜脈內膜及吻合口增生受到明顯抑制的含靜脈瓣的生物源性靜脈的制備方法。

本發(fā)明的技術方案為：一種預防異種植入后內膜增生的含靜脈瓣的生物源性靜脈的制備方法，其特征在于，步驟為：

a、剪取直徑0.5～1.5cm，長3～5cm含有完整瓣膜的豬或牛的頸靜脈管道，清理并消毒；

b、對步驟a中得到的材料進行細胞裂解處理、細胞消化及核酸消化處理；