[發明專利]位于白菜A04染色體上的抗霜霉病基因BrRLP48及與其相連鎖的SNP標記

有效

• 申請號: 201811086138.2
• 申請日: 2018-09-18
• 公開（公告）號: CN109136401B
• 公開（公告）日: 2019-06-18
• 發明（設計）人: 于拴倉;張彬;蘇同兵;張鳳蘭;李佩榮;李盼;余陽俊;張德雙;趙岫云;汪維紅
• 申請（專利權）人: 北京市農林科學院
• 主分類號: C12Q1/6895
• 分類號: C12Q1/6895;C12N15/11
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢;陳曉慶

本發明公開了位于白菜A04染色體上的抗霜霉病基因BrRLP48及與其相連鎖的SNP標記。本發明利用白菜抗病自交系“MM”和感病自交系“白陽”的DH群體和F₂群體在白菜第4號染色體上成功定位到與白菜霜霉病抗性相關的QTL位點Br?DM04，可以解釋22.3％的表型變異，并找到抗霜霉病基因及與其連鎖的SNP分子標記A04_5326733。基于KASP技術的分子標記A04_5326733可用于白菜霜霉病抗性品種鑒定及分子育種。

技術領域

本發明屬于生物技術領域，具體涉及位于白菜A04染色體上的抗霜霉病基因BrRLP48及 與其相連鎖的SNP標記。

背景技術

大白菜原產我國，是我國栽培面積最大的蔬菜作物，目前已逐漸成為世界性的蔬菜作物。 據農業部統計，我國大白菜年種植面積近4000萬畝，占全國蔬菜總播種面積的15％左右，可 見大白菜在我國菜籃子工程中舉足輕重。植物病害是影響植物正常生長重大威脅之一。尤其 在農業生產中，病害會直接影響農作物的產量和質量。霜霉病是由專性寄生霜霉菌 (Hyaloperonosporaparasitica)引起的真菌病害，是危害大白菜的三大病害(病毒病、霜 霉病和軟腐病)之一，該病流行范圍廣、發病速度快，對白菜的產量和品質造成嚴重影響， 流行年份發病率高達80-90％，減產30-50％。生產中通常使用殺菌劑進行霜霉病防治，不僅 增加了生產成本，造成環境污染，還可能引起霜霉菌生理小種的變異及病原菌的抗藥性。因 此，霜霉病抗性品種的培育成為降低病害損失的最安全高效的方法之一。

遺傳學研究表明，白菜霜霉病抗性是一個復雜的數量性狀，涉及多種抗病基因，依靠傳 統的育種方法獲得抗病白菜的周期較長。隨著分子生物學的發展，分子輔助育種技術可以在 早世代進行準確、穩定的選擇，從而加速育種進程，提高育種效率，但該技術的基礎是必須 具有優良的目標基因及與其緊密連鎖的分子標記。

發明內容

本發明的第一個目的是提供檢測白菜基因組中A04_5326733位點的多態性或基因型的物 質或A04_5326733位點的新用途。

本發明提供了檢測白菜基因組中A04_5326733位點的多態性或基因型的物質或A04_5326733位點在如下(1)-(6)任一中的應用：

(1)鑒定或輔助鑒定白菜霜霉病抗性；

(2)篩選或輔助篩選抗霜霉病的白菜品種；

(3)白菜育種；

(4)制備鑒定或輔助鑒定白菜霜霉病抗性的產品；

(5)制備篩選或輔助篩選抗霜霉病的白菜品種的產品；

(6)制備白菜育種的產品；

所述A04_5326733位點為白菜基因組中序列1自5’端起第101位核苷酸，A04_5326733 位點為T/A多態。

上述應用中，所述檢測白菜基因組中A04_5326733位點的多態性或基因型的物質包括由 引物1、引物2和引物3所組成的引物組；

所述引物1為如下a1)或a2)：

a1)序列2所示的單鏈DNA分子；

a2)將a1)限定的單鏈DNA分子進行一個或幾個堿基的缺失、插入和/或改變得到的與 a1)限定的單鏈DNA分子具有相同功能的單鏈DNA分子；

所述引物2為如下b1)或b2)：

b1)序列3所示的單鏈DNA分子；

b2)將b1)限定的單鏈DNA分子進行一個或幾個堿基的缺失、插入和/或改變得到的與 b1)限定的單鏈DNA分子具有相同功能的單鏈DNA分子；

所述引物3為如下c1)或c2)：