[發明專利]青蝦Rev3基因及其編碼蛋白和應用

有效

• 申請號: 201811085139.5
• 申請日: 2018-09-18
• 公開（公告）號: CN109251931B
• 公開（公告）日: 2022-04-01
• 發明（設計）人: 金舒博;傅洪拓;喬慧;張文宜;孫盛明;蔣速飛;熊貽偉;龔永生;吳滟
• 申請（專利權）人: 中國水產科學研究院淡水漁業研究中心
• 主分類號: C12N15/12
• 分類號: C12N15/12;C07K14/435;C12Q1/6888
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司 32200
• 代理人: 余俊杰

本發明公開了青蝦Rev3基因及其編碼蛋白和應用，Rev3基因部分cDNA序列如SEQ ID NO:1所示，其中3’端為完整序列。與現有技術相比，本發明具有以下優點：(1)本發明所述青蝦Rev3基因在青蝦雄性分化及發育過程中的重要作用，為青蝦雄性分化及其發育機制的研究提供理論依據和思路；(2)本發明所述青蝦Rev3基因能夠調控青蝦免疫應答機制；(3)本發明所述青蝦Rev3基因能夠用于青蝦全雄群體選育中，在青蝦養殖過程中具有顯著的經濟價值和應用前景。

技術領域

本發明屬于生物技術領域，涉及青蝦的發育調控，具體為青蝦Rev3基因及其編碼蛋白和應用。

背景技術

青蝦，學名日本沼蝦(Macrobrachium nipponense)，俗稱河蝦，隸屬十足目(Decapoda)、長臂蝦科(Palaemonidae)、沼蝦屬(Macrobrachium)，廣泛分布于我國各地水域，生長快、適應性強、養殖經濟效益高，是我國重要的淡水養殖蝦類。據2012年《中國漁業年鑒》記載，全國養殖青蝦年產量超過23萬噸，年產值超過150億元，是目前淡水養殖業中最有發展前途的品種之一。在青蝦養殖過程中存在著顯著的雌雄生長差異現象，即雄性青蝦的生長速度顯著快于雌性青蝦，在收獲季節，雄性青蝦的個體大小為雌性青蝦的2-2.5倍，青蝦全雄群體選育具有顯著的經濟價值以及應用前景。因此，全面了解青蝦雄性分化以及發育機制，建立青蝦性別選育技術刻不容緩。

促雄腺是甲殼類動物特有的內分泌腺，其分泌的激素對甲殼類動物雄性分化及雄性特征維持起重要的作用。先前研究結果表明，在雄性羅氏沼蝦中拔除促雄腺，可誘使雄性羅氏沼蝦分化出雌性特征；在雌性羅氏沼蝦中植入促雄腺，可誘使雌性羅氏沼蝦分化出雄性特征。基于促雄腺在甲殼類動物雄性分化及發育過程中的重要作用，對促雄腺中表達基因的研究成為近些年來的熱點。本課題組從青蝦轉錄組文庫及青蝦蛋白質文庫中篩選得到編碼Rev3基因的mRNA序列以及蛋白質序列。Rev3基因在人類中證明參與免疫應答系統。Rev3基因可促進DNA合成，降低UV照射對培養的人類纖維原細胞突變。但Rev3基因在甲殼類動物中研究尚未見報道，其功能未知。

原位雜交(In situ hybridization)技術是一種廣泛存在于真核生物中的高效的序列特異性基因定位技術。原位雜交技術是透過靶基因序列設計帶有熒光信號的特異性序列探針，通過與組織學切片雜交，從而對基因在組織中進行準確定位以及功能研究。近年開始在甲殼動物基因功能研究中使用。目前，關于Rev3基因的原位雜交研究尚未見報道。

發明內容

解決的技術問題：為了克服現有技術的不足，闡明Rev3基因在青蝦雄性分化及發育過程中的重要作用，為青蝦雄性分化及其發育機制的研究提供理論依據和思路，本發明提供了青蝦Rev3基因及其編碼蛋白和應用。

技術方案：青蝦Rev3(DNA polymerase zeta catalytic subunit，Rev3)基因，Rev3基因部分cDNA序列如SEQ ID NO:1所示，其中3’端為完整序列。SEQ ID NO:1序列如下：