[發(fā)明專利]一種檢測(cè)犬巴貝斯蟲試劑盒及檢測(cè)方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201811077107.0
• 申請(qǐng)日: 2018-09-15
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN109136398A
• 公開(kāi)（公告）日: 2019-01-04
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王錦明;關(guān)貴全;楊吉飛;王曉星;劉志杰;殷宏;羅建勛
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所
• 主分類號(hào): C12Q1/6893
• 分類號(hào): C12Q1/6893;C12Q1/6851
• 代理公司: 蘭州振華專利代理有限責(zé)任公司 62102
• 代理人: 張晉

本發(fā)明公開(kāi)一種犬巴貝斯蟲病檢測(cè)試劑盒及非疾病診斷方法。本發(fā)明的檢測(cè)犬巴貝斯蟲試劑盒中至少包括有序列為SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2的兩條擴(kuò)增引物。利用本發(fā)明的試劑盒進(jìn)行檢測(cè)的方法具有重復(fù)性好、靈敏度高、速度快和全封閉反應(yīng)等優(yōu)點(diǎn)，檢測(cè)方法具有特異性好、敏感性高和可重復(fù)性的特點(diǎn)，使其能更好地用于犬體內(nèi)梨形蟲的鑒別檢測(cè)。本方法囊括了國(guó)內(nèi)現(xiàn)存的犬巴貝斯蟲病病原，檢測(cè)范圍廣，可用于犬巴貝斯蟲種的鑒別檢測(cè)和流行病學(xué)調(diào)查。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種脊椎動(dòng)物寄生蟲的試劑盒及其非疾病檢測(cè)方法，確切講本發(fā)明涉及一種犬巴貝斯蟲病檢測(cè)試劑盒及非疾病診斷方法。

背景技術(shù)

巴貝斯蟲病是一種蜱傳性的血液原蟲病，該病由寄生于紅細(xì)胞內(nèi)的多種巴貝斯蟲引起，其臨床特征為發(fā)熱、精神沉郁、嗜睡、黃疸、貧血、血紅蛋白尿、嘔吐、呼吸困難等，對(duì)犬的健康造成了巨大的危害。到目前為止，導(dǎo)致犬巴貝斯蟲病的病原主要有6種，根據(jù)蟲體形態(tài)特征可分為大巴貝斯蟲和小巴貝斯蟲（Laia et al, 2016）。大巴貝斯蟲有3種，分別是：韋氏巴貝斯蟲（Babesia canis vogeli）、犬巴貝斯蟲（Babesia canis）和羅氏巴貝斯蟲（Babesia canis rossi）。小巴貝斯蟲有：吉氏巴貝斯蟲（Babesia gibsoni）、康氏巴貝斯蟲（Babesia conradae）和vulpes巴貝斯蟲（Babesia vulpes）。

我國(guó)對(duì)犬巴貝斯蟲病的報(bào)道最早在1985的河南，隨后在江蘇、江西、浙江、安徽、河南、陜西、遼寧、山東等地均有報(bào)道(呂文祥等，1989；陳啟軍等，1993；劉躍生，2002；Chen etal, 2014; Xu et al, 2015; Zhang et al, 2016; He et al, 2017; Wang et al,2018)。流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示，在我國(guó)流行的巴貝斯蟲病病原主要有犬巴貝斯蟲（Babesia canis canis）、羅氏巴貝斯蟲（Babesia canis rossi）、韋氏巴貝斯蟲（Babesia canis vogeli）、吉氏巴貝斯蟲（Babesia gibsoni）和康氏巴貝斯蟲（Babesia conradae）（He etal, 2017；Wang et al, 2018）。近年來(lái)我國(guó)犬的數(shù)量呈現(xiàn)逐年上升的趨勢(shì)，截至2012年我國(guó)寵物犬?dāng)?shù)量已達(dá)1.3億只。利用血清學(xué)和分子生物學(xué)技術(shù)對(duì)犬巴貝斯蟲的流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示，該病流行范圍廣，其陽(yáng)性率為2.47%-11.86%（Xu et al，2015；Zhang et al，2017；Wang et al，2018）。進(jìn)行犬巴貝斯蟲的研究，對(duì)養(yǎng)犬業(yè)和公共衛(wèi)生有重要的意義，對(duì)巴貝斯蟲的鑒別檢測(cè)也是寄生蟲學(xué)研究的重要內(nèi)容，有益于針對(duì)性地預(yù)防和控制犬巴貝斯蟲病。

對(duì)感染犬的五種巴貝斯蟲進(jìn)行大小群體（區(qū)分大巴貝斯蟲和小巴貝斯蟲）的形態(tài)鑒定相對(duì)容易，然而要進(jìn)行蟲種的鑒別十分困難，也存在一定的局限性。隨著現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展，國(guó)內(nèi)外學(xué)者應(yīng)用PCR、實(shí)時(shí)熒光定量PCR（Real-time PCR）、反向線狀印跡技術(shù)（RLB）等對(duì)犬巴貝斯蟲進(jìn)行檢測(cè)。這些方法敏感性和特異性均較高，但每次只能鑒定出一種病原體，無(wú)法同時(shí)實(shí)現(xiàn)多種病原的鑒別檢測(cè)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明提供一種可克服現(xiàn)有技術(shù)不足的用于檢測(cè)犬巴貝斯蟲試劑盒，以及利用這種試劑盒進(jìn)行非疾病檢測(cè)目的的檢測(cè)方法。

本發(fā)明的檢測(cè)犬巴貝斯蟲試劑盒中至少包括有序列為SEQ ID NO.1和SEQ IDNO.2的兩條擴(kuò)增引物。