[發(fā)明專利]GPR65蛋白在制備腦膠質(zhì)母細胞瘤預后評估試劑盒中的應用及評估方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201811075732.1
• 申請日: 2018-09-14
• 公開（公告）號: CN109406792A
• 公開（公告）日: 2019-03-01
• 發(fā)明（設計）人: 李峰;黃麒霖;陳菊祥;嚴勇;徐濤;王洪祥;龔振宇;洪帆
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍第二軍醫(yī)大學第二附屬醫(yī)院
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/574;G01N33/58;G01N1/30
• 代理公司: 上海順華專利代理有限責任公司 31203
• 代理人: 陸林輝

1.GPR65蛋白在制備腦膠質(zhì)母細胞瘤預后評估試劑盒中的應用。

2.根據(jù)權利要求1所述的應用，其特征在于，所述腦膠質(zhì)母細胞瘤預后評估試劑盒包含檢測腦膠質(zhì)母細胞瘤組織樣本中GPR65蛋白相對表達量的試劑。

3.一種腦膠質(zhì)母細胞瘤預后評估試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包含檢測腦膠質(zhì)母細胞瘤組織樣本中GPR65蛋白相對表達量的試劑。

4.根據(jù)權利要求3所述的腦膠質(zhì)母細胞瘤預后評估試劑盒，其特征在于，所述的檢測腦膠質(zhì)母細胞瘤組織樣本中GPR65蛋白相對表達量的試劑包括GPR65蛋白抗體以及與GPR65蛋白相對表達量檢測相配套的試劑。

5.根據(jù)權利要求4所述的腦膠質(zhì)母細胞瘤預后評估試劑盒，其特征在于，所述的GPR65蛋白抗體為單克隆抗體或多克隆抗體。

6.根據(jù)權利要求4所述的腦膠質(zhì)母細胞瘤預后評估試劑盒，其特征在于，所述GPR65蛋白相對表達量檢測為免疫組化檢測方法，與免疫組化檢測相配套的試劑包括：二甲苯、乙醇、H₂O₂體積分數(shù)為1-3％的H₂O₂-甲醇液、BSA封閉液、DAB顯色試劑、蘇木素、辣根過氧化物酶、PBS、0.1M EDTA抗原修復緩沖液。

7.一種腦膠質(zhì)母細胞瘤預后的評估方法，其特征在于，包括以下步驟：

1)取腦膠質(zhì)母細胞瘤組織樣本，制成石蠟切片；

2)利用GPR65蛋白抗體以及與免疫組化檢測相配套的試劑，對石蠟切片進行免疫組化染色；

3)光鏡下觀察腦膠質(zhì)母細胞瘤組織染色情況，進行免疫組化評分；

評分方法及標準為：每個樣本隨機選擇至少3個高倍鏡視野，每個視野計數(shù)100個細胞，以細胞漿內(nèi)出現(xiàn)黃/棕/褐色為陽性細胞，；

按照染色強度，分為四個等級：無染色記為0分，淺黃色記為1分，棕黃色記為2分，棕褐色記為3分；

按照陽性細胞個數(shù)所占比例，分為四個等級：無陽性細胞記為0分，陽性細胞比例＜25％記為1分，25-75％記為2分，＞75％記為3分；

以染色強度的積分乘以陽性細胞個數(shù)所占比例的積分，求平均值后即為該樣本中GPR65蛋白在相應腫瘤組織中相對表達量的綜合評分，積分范圍為0-9分；

4)依據(jù)GPR65蛋白在相應腫瘤組織中相對表達量的綜合評分評估膠質(zhì)母細胞瘤患者的生存預后情況。

8.根據(jù)權利要求7述的腦膠質(zhì)母細胞瘤預后的評估方法，其特征在于，所述的GPR65蛋白抗體為單克隆抗體或多克隆抗體。

9.根據(jù)權利要求7所述的腦膠質(zhì)母細胞瘤預后的評估方法，其特征在于，所述的與免疫組化檢測相配套的試劑包括：二甲苯、乙醇、H₂O₂體積分數(shù)為1-3％的H₂O₂-甲醇液、BSA封閉液、DAB顯色試劑、蘇木素、辣根過氧化物酶、PBS、0.1M EDTA抗原修復緩沖液。

10.根據(jù)權利要求7所述的腦膠質(zhì)母細胞瘤預后的評估方法，其特征在于，當GPR65蛋白在細胞漿中相對表達量的綜合評分＜5分時，腦膠質(zhì)母細胞瘤患者預后好；當GPR65蛋白在細胞漿中相對表達量的綜合評分＞5分時，腦膠質(zhì)母細胞瘤患者預后差。