[發(fā)明專利]一種構(gòu)建微生物共培養(yǎng)體系高產(chǎn)虎奶菇胞外多糖的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201811075059.1
• 申請日: 2018-09-14
• 公開（公告）號: CN109112175B
• 公開（公告）日: 2021-01-29
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳磊;葛夢蝶;林俊德;張薄博
• 申請（專利權(quán)）人: 江南大學(xué)
• 主分類號: C12P39/00
• 分類號: C12P39/00;C12P19/04;C12R1/645
• 代理公司: 哈爾濱市陽光惠遠(yuǎn)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 23211
• 代理人: 張勇

1.一種產(chǎn)虎奶菇胞外多糖的方法，其特征在于，利用乳酸菌和虎奶菇菌絲體兩種微生物構(gòu)建共培養(yǎng)體系，包括以下步驟：

（1）將虎奶菇菌絲體加入到種子培養(yǎng)液中預(yù)培養(yǎng)；將乳酸菌加入到液體培養(yǎng)基中進(jìn)行預(yù)培養(yǎng)；

（2）將虎奶菇菌絲體預(yù)培養(yǎng)后得到的培養(yǎng)液接入到發(fā)酵培養(yǎng)基中液態(tài)發(fā)酵7 d；

（3）在步驟（2）的發(fā)酵進(jìn)行至第3-6 d時(shí)，將乳酸菌預(yù)培養(yǎng)后得到的培養(yǎng)液接種到虎奶菇菌絲體發(fā)酵液中，進(jìn)行共培養(yǎng)；

（4）發(fā)酵結(jié)束后離心、過濾，所得濾液即為發(fā)酵液，向發(fā)酵液中加入乙醇，攪拌，靜置后收集沉淀，溶解沉淀，冷凍干燥，獲得虎奶菇胞外多糖；

步驟（2）中所述的液態(tài)發(fā)酵是指虎奶菇菌絲體培養(yǎng)液的接種量為5-10%，接入發(fā)酵培養(yǎng)基發(fā)酵7 d；

步驟（3）中所述的共培養(yǎng)是指在發(fā)酵至第3-6 d時(shí)，將乳酸菌接種到虎奶菇菌絲體發(fā)酵液中，接種量為2.5-10%，將乳酸菌和虎奶菇共培養(yǎng)。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟（1）中所述的虎奶菇菌絲體的預(yù)培養(yǎng)是將虎奶菇菌絲加入到種子培養(yǎng)液中，在160-200 rpm，26-32℃條件下預(yù)培養(yǎng)2-4 d。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟（1）中所述的乳酸菌的預(yù)培養(yǎng)是將乳酸菌加入到MRS培養(yǎng)基中，在100-120 rpm，30-40 ℃條件下預(yù)培養(yǎng)18-36 h。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟（2）中所述的液態(tài)發(fā)酵是指虎奶菇菌絲體培養(yǎng)液的接種量為5-10%，接入發(fā)酵培養(yǎng)基，在150-200 rpm，25-32 ℃下發(fā)酵7 d。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟（1）中虎奶菇菌絲體的種子培養(yǎng)液和步驟（2）中發(fā)酵培養(yǎng)基配方為：葡萄糖20-40 g/L，酵母浸粉3-5 g/L，磷酸二氫鉀（KH₂PO₄）0.5-1.5 g/L，七水硫酸鎂（MgSO₄?7H₂O）0.4-1.0 g/L。

6.根據(jù)權(quán)利要求1或5所述的方法，其特征在于，步驟（3）中所述的共培養(yǎng)是指在發(fā)酵至第3-6 d時(shí)，將乳酸菌接種到虎奶菇菌絲體發(fā)酵液中，接種量為2.5-10%，在150-200 rpm，26-35 ℃條件下共培養(yǎng)1-4 d。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟（4）中離心指的是3000-5000 g離心5-10 min。

8.根據(jù)權(quán)利要求1或7所述的方法，其特征在于，步驟（4）中所述的獲得胞外多糖的方法為：向離心、過濾后的發(fā)酵濾液中加入發(fā)酵液3-5倍體積的95%乙醇，攪拌，靜置5-8 h，將沉淀物用水溶解后冷凍干燥。

9.權(quán)利要求1-8任一項(xiàng)所述的方法在生物工程、食品、醫(yī)藥或保健品領(lǐng)域的應(yīng)用。