[發明專利]一種基于SFTS重組NP蛋白納米粒子免疫檢測方法

在審

• 申請號: 201811074102.2
• 申請日: 2018-09-14
• 公開（公告）號: CN109212231A
• 公開（公告）日: 2019-01-15
• 發明（設計）人: 冷毅斌;胡勤芹;夏紅星;馮亮
• 申請（專利權）人: 武漢優恩生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68
• 代理公司: 上海精晟知識產權代理有限公司 31253
• 代理人: 馮子玲

本發明公開了一種基于SFTS重組NP蛋白納米粒子免疫檢測方法，具體檢測方法步驟如下：步驟一：使用上轉換納米粒子分別標記包被用SFTS重組NP蛋白，再加入0.02?0.06mg/ml的植物凝集素稀釋液，制備檢測分析液；步驟二：將待檢測血清與檢測分析液以1:1混合均勻，將100μl混合液加入檢測卡的點樣孔；步驟三：利用熒光掃描檢測儀對步驟二中的混合液體進行檢測，計算出誤差的大小；步驟四：在步驟三正常的基礎上利用熒光免疫層析法檢測100例健康人血清；步驟五：將步驟四的檢測結果傳輸到單片機控制器中讀取T/C值，并計算均值(A)、標準偏差(SD)和Cutoff值。該發明一種基于SFTS重組NP蛋白納米粒子免疫檢測方法，檢測速度快，數據處理精準，實用性強，便于生產，適合廣泛推廣使用。

技術領域

本發明屬于免疫檢測技術領域，具體涉及一種基于SFTS重組NP蛋白納米粒子免疫檢測方法。

背景技術

市場上的膠體金免疫層析試劑，雖然簡單、成本低，適用于現場快速檢測，但方法中的金顆粒示蹤物的特性決定了其檢測系統的缺陷，檢測靈敏度低，假陰性率偏高。SFTSV是自然疫源性疾病，通常發生于山區和丘陵等醫療衛生條件相對較差的地區，醫療衛生水平較低，加之病例就醫觀念較差，極大地影響了疾病的早期診斷與治療。

發明內容

本發明的目的在于提供一種基于SFTS重組NP蛋白納米粒子免疫檢測方法，以解決上述背景技術中提出的但方法中的金顆粒示蹤物的特性決定了其檢測系統的缺陷，檢測靈敏度低，假陰性率偏高。SFTSV是自然疫源性疾病，通常發生于山區和丘陵等醫療衛生條件相對較差的地區，醫療衛生水平較低，加之病例就醫觀念較差，極大地影響了疾病的早期診斷與治療的問題。

為實現上述目的，本發明提供如下技術方案：一種基于SFTS重組NP蛋白納米粒子免疫檢測方法，具體檢測方法步驟如下：

步驟一：使用上轉換納米粒子分別標記包被用SFTS重組NP蛋白，再加入0.02-0.06mg/ml的植物凝集素稀釋液，制備檢測分析液；

步驟二：將待檢測血清與檢測分析液以1:1混合均勻，將100μl混合液加入檢測卡的點樣孔；

步驟三：利用熒光掃描檢測儀對步驟二中的混合液體進行檢測，計算出誤差的大小；

步驟四：在步驟三正常的基礎上利用熒光免疫層析法檢測100例健康人血清；

步驟五：將步驟四的檢測結果傳輸到單片機控制器中讀取T/C值，并計算均值(A)、標準偏差(SD)和Cutoff值；

步驟六：將步驟四中檢測數據利用單片機控制器進行獨立元分析法(ICA)進行數據預處理、分析和運算；

步驟七：所述處理器內包括歷史曲線模塊和查詢模塊和對比分析模塊，將步驟五和步驟六的計算處理數據傳輸到對比分析模塊進行對比分析；

步驟八：將檢測分析結果通過無線傳輸模塊傳送帶顯示器上。

進一步地，所述步驟四中以固定有檢測線和質控線的條狀纖維層析材料為固定相，測試液為流動相，熒光標記抗體或抗原固定于連接墊，通過毛細管作用使待分析物在層析條上移動。

進一步地，所述步驟五中，Cutoff值＝T/C均值+2SD。

進一步地，所述熒光免疫分析的標記物主要包括熒光素、量子點等。

進一步地，所述步驟七中歷史曲線模塊可以將以往的檢測結果以曲線的方式呈現，查詢模塊與PC終端和手機客戶端通過網絡相連。

進一步地，所述步驟一中加入植物凝集素稀釋液10-15min后加入敏化劑。

與現有技術相比，本發明的有益效果是：