[發明專利]一種測定低密度脂蛋白膽固醇的試劑及其穩定劑的制備方法

在審

• 申請號: 201811073072.3
• 申請日: 2018-09-14
• 公開（公告）號: CN109283345A
• 公開（公告）日: 2019-01-29
• 發明（設計）人: 王賢理;池萬余;鄧慰;盧強
• 申請（專利權）人: 浙江伊利康生物技術有限公司
• 主分類號: G01N33/92
• 分類號: G01N33/92
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明涉及一種測定低密度脂蛋白膽固醇的試劑及其穩定劑的制備方法，測試試劑本體，按照重量份數，還包括有穩定劑；所述穩定劑包括1?4份蔗糖、2?4份甘油、0.5份MgCl2、0.2?0.4份牛血清白蛋白、0.5?1份海藻糖、0.1?0.4份聚乙二醇2000、4?8份水楊酸鈉、3?6份蛋白酶抑制劑、3?6份抗干擾物質，其具有保存時間長的優點。

技術領域

本發明涉及生物化學技術領域，具體涉及一種測定低密度脂蛋白膽固醇的試劑及其穩定劑的制備方法。

背景技術

膽固醇是人體不可缺少的重要物質，它不僅參與形成質膜，而且還是合成膽汁酸，維生素D以及甾體激素的原料。在正常血液中，膽固醇主要與低密度脂蛋白（LDL）結合以脂蛋白形式在血液中運轉，所結合的膽固醇稱為低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C），當細胞需要利用膽固醇合成質膜等物質時，細胞制造出LDL受體蛋白，并把它安裝到質膜上LDL與細胞表面手提結合后與溶酶體融合，將LDL上的膽固醇水解下來，用于質膜等物質合成。

隨著生活水平的提高，人們的飲食趨于精致化，常常不自覺地攝取過量的、高于人體細胞需求的膽固醇，這使得LDL在血液中的濃度不斷升高。而高濃度的LDL易被氧化成ox-LDL，然后被巨噬細胞吞噬，由于LDL上結合有膽固醇，所以會形成泡沫細胞沉積在動脈壁上，造成動脈粥樣硬化，最終引發心腦血管疾病。有研究表明，血液中LDL-C濃度每升高1%，患心腦血管疾病的風險增加2-3%。因此，檢測血液中LDL-C濃度對預防和治療心腦血管疾病具有重要意義。

目前，為了適應于全自動生化分析儀的普遍應用，出現了許多檢測LDL-C的方法。如抑制法，它的反應原理是采用一種表面活性劑，使高密度蛋白膽固醇、極低密度脂蛋白膽固醇和乳糜微粒受到抑制，使其結合的膽固醇不水解，而LDL-C結合的膽固醇水解下來，接著通過膽固醇氧化酶、過氧化物酶生成醌型有色化合物，然后檢測吸光度計算LDL-C的濃度。還有一種是利用兩種表面活性劑對高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇、極低密度脂蛋白膽固醇和乳糜微粒的親和力不同建立的消除法，它的反應原理是多聚陰離子與低密度脂蛋白膽固醇和表面活性劑I結合，在缺乏偶聯劑時不與膽固醇反應，而高密度脂蛋白膽固醇、極低密度脂蛋白膽固醇和乳糜微粒反應生成過氧化氫被消除，加入表面活性劑II使低密度脂蛋白膽固醇水解出膽固醇，這時整個反應體系中產物為低密度脂蛋白膽固醇，通過膽固醇顯色程度測定低密度脂蛋白膽固醇含量。但是，上述方法中所提及的表面活性劑均未公開，并且同時需要精密的全自動生化儀進行嚴格操作，這就使其在檢測LDL-C中不能被廣泛應用。

為了能夠使檢測方法廣泛應用，特別是能夠在一些基層醫療單位應用，現有技術利用沉淀劑與低密度脂蛋白反應生產懸濁液，然后檢測吸光度，由于反應產生的懸濁液吸光度與低密度脂蛋白膽固醇的濃度呈正比，所以通過比濁法計算就可以得到檢測結果。然而這種沉淀劑需要將血樣中干擾檢測的球蛋白、高密度脂蛋白等物質除去，使檢測步驟繁瑣、復雜，不利于快速檢測。同時沉淀劑法在準確度上略低于抑制法和消除法。

一篇中國授權公告號為CN102323225B的專利文案公開了一種檢測低密度脂蛋白膽固醇的方法和試劑盒。該方法將磷鎢酸與瓊脂膠組成pH值為6.1-6.2的混合液，待測樣品在鎂離子的作用下與混合液和聚乙二醇20000混合，得到懸濁液，然后在630nm波長下檢測吸光度，與經上述相同處理的標準溶液比濁，計算待測樣品的低密度脂蛋白膽固醇濃度。該方案中并未采用延長測試試劑的保存壽命的穩定劑，穩定效果并不理想，并且保存一段時間后便會失效，因此有待改進。

發明內容

針對現有技術存在的不足，本發明的目的在于提供一種測定低密度脂蛋白膽固醇的試劑，其具有保存時間長的優點。

為實現上述目的，本發明提供了如下技術方案：一種測定低密度脂蛋白膽固醇的試劑，包括測試試劑本體，按照重量份數，還包括有穩定劑；