[發(fā)明專利]一種檢測(cè)紅細(xì)胞中血紅蛋白F的檢測(cè)試劑及其應(yīng)用

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201811064880.3
• 申請(qǐng)日: 2018-09-10
• 公開（公告）號(hào): CN109115584A
• 公開（公告）日: 2019-01-01
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 朱宏遠(yuǎn);樊斐;翟燕紅;曹正
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京婦產(chǎn)醫(yī)院
• 主分類號(hào): G01N1/30
• 分類號(hào): G01N1/30;G01N15/00;G01N15/10
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

本發(fā)明涉及一種檢測(cè)紅細(xì)胞中血紅蛋白F的檢測(cè)試劑以及該檢測(cè)試劑的應(yīng)用，該檢測(cè)試劑包括酸性洗脫液和染色液，所述酸性洗脫液由以下原料制備：25％鹽酸溶液、蘇木精固體、三氯化鐵固體、95％乙醇溶液、蒸餾水；所述染色液由以下原料制備：伊紅固體、蒸餾水。該檢測(cè)試劑制備簡(jiǎn)單，檢出率高。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種檢測(cè)試劑，特別涉及一種檢測(cè)紅細(xì)胞中血紅蛋白F的檢測(cè)試劑以及該檢測(cè)試劑的應(yīng)用。

背景技術(shù)

近些年，胎母輸血綜合征逐漸引起婦產(chǎn)科醫(yī)生的重視，如何在早期診斷出這個(gè)發(fā)病隱匿且易造成嚴(yán)重后果的疾病成為婦產(chǎn)科醫(yī)生和檢驗(yàn)科醫(yī)生共同關(guān)注的重點(diǎn)。由于正常成年人體內(nèi)99.9％紅細(xì)胞含有血紅蛋白A不含血紅蛋白F，而胎兒體內(nèi)紅細(xì)胞均含有血紅蛋白F不含有血紅蛋白A，因此可以通過(guò)檢測(cè)孕產(chǎn)婦體內(nèi)血紅蛋白F含量，判斷是否發(fā)生胎母間輸血的情況。已知血紅蛋白F比血紅蛋白A具有更強(qiáng)的抗酸能力。因此，經(jīng)固定后的血片，置酸性緩沖液中保溫一定時(shí)間，只有含血紅蛋白F的紅細(xì)胞不被洗脫，如用伊紅染色呈鮮紅色。血紅蛋白F酸洗脫試驗(yàn)(K-B實(shí)驗(yàn))是目前各醫(yī)院最常用的定量檢測(cè)母體血液循環(huán)中胎兒紅細(xì)胞數(shù)目的方法。根據(jù)《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》(第三版)所規(guī)定的的方法進(jìn)行血紅蛋白F酸洗脫試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)本方法結(jié)果易受到溫度、人為操作因素等外在因素的影響，并且試驗(yàn)時(shí)間較長(zhǎng)。而且本法對(duì)于不含有血紅蛋白F的紅細(xì)胞洗脫效果不佳，導(dǎo)致判斷紅細(xì)胞是否含有血紅蛋白F結(jié)果區(qū)分不明顯，結(jié)果準(zhǔn)確性較差。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種新的檢測(cè)紅細(xì)胞中血紅蛋白F的檢測(cè)試劑，以解決上述背景技術(shù)中提出的問(wèn)題。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供如下技術(shù)方案：

一種檢測(cè)紅細(xì)胞中血紅蛋白F的檢測(cè)試劑，包括酸性洗脫液和染色液；所述酸性洗脫液由以下原料制備：25％鹽酸溶液、蘇木精固體、三氯化鐵固體、95％乙醇溶液、蒸餾水；所述染色液由以下原料制備：伊紅固體、蒸餾水；所述酸性洗脫液的制備方法如下：將0.75克蘇木精固體充分溶解于100毫升95％乙醇溶液，混勻，制得混合物A；將2.4克三氯化鐵固體充分溶解于2毫升25％鹽酸溶液，之后加入蒸餾水至100毫升，混勻，制得混合物B；混合物A與混合物B按照體積比5∶1比例混合均勻，即制得所述酸性洗脫液；所述染色液的制備方法如下：將1克伊紅固體充分溶解于100毫升蒸餾水中，混勻，即制得所述染色液。

一種如上所述的檢測(cè)試劑的應(yīng)用，其步驟如下：(1)將血片用80％乙醇固定5分鐘，將固定好的血片置于40℃-50℃的所述酸性洗脫液中保溫1分鐘，水洗待干；(2)將干燥后的血片用所述染色液染色1分鐘，水洗待干；(3)將干燥后的血片置于顯微鏡下，參照網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)方法計(jì)數(shù)1000個(gè)紅細(xì)胞中血紅蛋白F陽(yáng)性紅細(xì)胞所占百分率。

一種如上所述的檢測(cè)試劑的用途，所述檢測(cè)試劑被用于檢測(cè)血紅蛋白F在紅細(xì)胞中所占百分率。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果是：本發(fā)明的檢測(cè)試劑對(duì)不含有血紅蛋白F的紅細(xì)胞洗脫能力更強(qiáng)，使得紅細(xì)胞有無(wú)血紅蛋白F結(jié)果區(qū)分明顯，改善觀察者容易視覺(jué)疲勞的狀況，便于顯微鏡下計(jì)數(shù)，計(jì)數(shù)結(jié)果準(zhǔn)確性好。并且，用本發(fā)明的檢測(cè)試劑進(jìn)行血紅蛋白F酸洗脫試驗(yàn)，可大大縮短試驗(yàn)時(shí)間，減少操作步驟，同時(shí)降低外界因素干擾概率，便于實(shí)驗(yàn)室快速檢查。

附圖說(shuō)明

為了更清楚地說(shuō)明本發(fā)明的技術(shù)方案，下面結(jié)合附圖和實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的說(shuō)明。

附圖1所示為使用實(shí)施例1的檢測(cè)試劑在孕婦外周血中檢測(cè)血紅蛋白F的染色圖片；

附圖2所示為使用實(shí)施例2的檢測(cè)試劑在孕婦外周血中檢測(cè)血紅蛋白F的染色圖片。

具體實(shí)施方式

下面將結(jié)合實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行清晰、完整地描述?；诒景l(fā)明中的實(shí)施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒(méi)有做出創(chuàng)造性勞動(dòng)前提下所獲得的的所有其他實(shí)施例，都屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。