[發明專利]一種大鼠CD4抗體包被磁珠及其制備方法和應用以及含該磁珠的試劑盒在審
| 申請號： | 201811064688.4 | 申請日： | 2018-09-12 |
| 公開（公告）號： | CN109187958A | 公開（公告）日： | 2019-01-11 |
| 發明（設計）人： | 周浩 | 申請（專利權）人： | 福建中醫藥大學附屬人民醫院(福建省人民醫院） |
| 主分類號： | G01N33/543 | 分類號： | G01N33/543;G01N33/553;G01N33/531 |
| 代理公司： | 北京盛凡智榮知識產權代理有限公司 11616 | 代理人： | 劉曉暉 |
| 地址： | 350004 福*** | 國省代碼： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 磁珠 大鼠 包被 試劑盒 制備 制備方法和應用 免疫排斥反應 腎移植 免疫細胞功能 測定試劑盒 上清液 檢測 洗滌 應用 | ||
1.一種大鼠CD4抗體包被磁珠的制備方法，其特征在于：所述方法包括以下步驟：
步驟1：將磁珠通過C1試劑洗滌，之后放在磁鐵上吸附后去上清液；
步驟2：將步驟1預處理的磁珠中加入抗體、C1試劑、C2試劑后，在25-37℃條件下離心旋轉16-24h；
步驟3：將步驟2處理的磁珠通過磁鐵沉淀，后通過HB試劑進行清洗；
步驟4：將步驟3處理的磁珠通過磁鐵沉淀后去上清，后通過LB試劑進行清洗；
步驟5：將步驟4處理的磁珠通過磁鐵沉淀后去上清，后通過SB試劑進行清洗；
步驟6：將步驟5處理的磁珠再加入SB試劑，離心處理，之后放置于磁鐵吸附后去除上清液，完成大鼠CD4抗體包被磁珠的制備；
其中，C1試劑為60-100％丙烯醛緩沖液，C2試劑為PBS緩沖液；所述HB試劑、LB試劑、SB試劑均為0.01％-0.1％Tween20。
2.根據權利要求1所述的大鼠CD4抗體包被磁珠的制備方法，其特征在于：它還包括步驟7：將步驟6處理的磁珠中加入SB試劑，在2-8℃下儲存。
3.根據權利要求1所述的大鼠CD4抗體包被磁珠的制備方法，其特征在于：步驟2中，磁珠和抗體、C1試劑、C2試劑的重量體積比為1mg：15-20ul：20-30ul：40-60ul。
4.根據權利要求1所述的大鼠CD4抗體包被磁珠的制備方法，其特征在于：步驟3中，磁珠和HB試劑的重量體積比為1mg：30-40ul。
5.根據權利要求1所述的大鼠CD4抗體包被磁珠的制備方法，其特征在于：步驟4中，磁珠和LB試劑的重量體積比為1mg：30-40ul。
6.根據權利要求1所述的大鼠CD4抗體包被磁珠的制備方法，其特征在于：步驟5中，磁珠和SB試劑的重量體積比為1mg：30-40ul。
7.根據權利要求1所述的大鼠CD4抗體包被磁珠的制備方法，其特征在于：所述抗體為兔抗鼠的抗體。
8.根據權利要求1-7中任意一項所述制備方法制得的大鼠CD4抗體包被磁珠。
9.一種試劑盒，其特征在于：所述試劑盒包括權利要求8所述的大鼠CD4抗體包被磁珠。
10.根據權利要求8所述大鼠CD4抗體包被磁珠在檢測大鼠腎移植后的免疫排斥反應中的應用。
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