[發明專利]一種人的NF-κB關鍵調節因子突變蛋白及其應用

在審

• 申請號: 201811055146.0
• 申請日: 2018-09-11
• 公開（公告）號: CN109251239A
• 公開（公告）日: 2019-01-22
• 發明（設計）人: 張耀洲;吳玉乾;馮建華;李冬梅;張樹軍;陳玉皎;王文雅
• 申請（專利權）人: 天津市湖濱盤古基因科學發展有限公司
• 主分類號: C07K14/47
• 分類號: C07K14/47;C12N15/12;C12Q1/6886;C07K16/18;G01N33/577;G01N33/574
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本發明涉及一種人的NF?κB關鍵調節因子突變蛋白及其應用，通過將大量乳腺癌患者作為研究病例，對病例進行基因檢測并分析，確定出人的NF?κB關鍵調節因子的突變蛋白，根據該人的NF?κB關鍵調節因子的突變蛋白制備基因芯片、單克隆抗體和ELISA試劑盒，為乳腺癌的基因診斷提供指引作用，并為癌癥的診斷和治療提供一定的理論基礎。

技術領域

本發明涉及一種基因工程領域，尤其涉及一種人的NF-κB關鍵調節因子突變蛋白及其應用。

背景技術

NF-κB關鍵調節因子(NF-kappa-B essential modulator,NEMO)基因位于Xq28，編碼產物NEMO/IKK蛋白分子量為48kD。該家族的轉錄因子在炎癥，細胞凋亡，發展和癌癥具有關鍵作用。在協調各種控制免疫反應的基因的表達中心發揮作用。NEMO/IkB激酶(IKK)蛋白是IKK復合體的調節亞單位，是核轉錄因子(NF-kB)的關鍵調節因子。

人的NF-κB關鍵調節因子發生突變會對人類健康造成嚴重影響。在對某些乳腺癌患者的外周血進行基因測序的過程中，均發現患者的NF-κB關鍵調節因子發生了突變，因此，對人的NF-κB關鍵調節因子突變的檢測對判斷人體是否患有癌癥具有一定的指引作用。

發明內容

本發明目的在于提供一種人的NF-κB關鍵調節因子突變蛋白及其應用。

本發明技術方案包括：

第一方面，提供一種人的NF-κB關鍵調節因子突變蛋白，其氨基酸序列如SEQ IDNO:1所示。

第二方面，提供一種人的NF-κB關鍵調節因子突變蛋白的編碼基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。

第三方面，提供一種基因芯片，包括：固相載體和固定在該載體上的核苷酸探針；所述核苷酸探針根據上述所述人的NF-κB關鍵調節因子突變蛋白的核苷酸序列，與人的NF-κB關鍵調節因子正常蛋白的核苷酸序列的比對結果確定。

優選地，所述核苷酸探針為SEQ ID NO:3所示的堿基序列；

或，所述核苷酸探針為SEQ ID NO:4所示的堿基序列；

或，所述核苷酸探針為SEQ ID NO:5所示的堿基序列。

第四方面，提供一種試劑，所述試劑中含有用于檢測上述人的NF-κB關鍵調節因子突變蛋白的引物對。

優選地，其所述引物對包括下述任一上游引物與下述任一下游引物的組合：

上游引物為如SEQ ID NO:8～NO:25中任一所示的堿基序列；

下游引物為如SEQ ID NO:26～NO:40中任一所示的堿基序列。

第五方面，提供一種特異性識別人的NF-κB關鍵調節因子突變蛋白的單克隆抗體，由上述的試劑制備而成，其可與SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列特異性結合。

第六方面，提供一種用于檢測人的NF-κB關鍵調節因子突變蛋白的ELISA試劑盒，所述ELISA試劑盒包括：包被有上述單克隆抗體的ELISA酶標板、酶標二抗、樣品稀釋液、包被緩沖液、ELISA酶標板洗滌液、顯色液和終止液。

優選地，所述酶標二抗為稀釋的HRP辣根過氧化物酶標記的山羊抗人IgG。

本發明提供了一種人的NF-κB關鍵調節因子突變蛋白及其應用，將大量乳腺癌患者作為研究病例，對病例進行基因檢測并分析，確定出人的NF-κB關鍵調節因子的突變蛋白，根據該人的NF-κB關鍵調節因子突變蛋白制備基因芯片、單克隆抗體和ELISA試劑盒，為乳腺癌的基因診斷提供指引作用，為癌癥的診斷和治療提供一定的理論基礎。