[發明專利]NADH脫氫酶（輔酶Q）1，α/β亞復合突變蛋白及其應用

在審

• 申請號: 201811054349.8
• 申請日: 2018-09-11
• 公開（公告）號: CN109251904A
• 公開（公告）日: 2019-01-22
• 發明（設計）人: 張耀洲;吳玉乾;馮建華;李冬梅;張樹軍;陳玉皎;王文雅
• 申請（專利權）人: 天津市湖濱盤古基因科學發展有限公司
• 主分類號: C12N9/02
• 分類號: C12N9/02;C12N15/53;C12Q1/6886;C07K16/40;G01N33/577;G01N33/574
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本發明涉及一種人的NADH脫氫酶(輔酶Q)1，α/β亞復合突變蛋白及其應用，將若干白血病患者作為研究病例，對病例進行基因檢測并分析，確定出人的NADH脫氫酶(輔酶Q)1，α/β亞復合的突變蛋白，根據該人的NADH脫氫酶(輔酶Q)1，α/β亞復合突變蛋白制備基因芯片、單克隆抗體和ELISA試劑盒，為白血病的基因診斷提供指引作用，為實現白血病的診斷和治療提供科學基礎。

技術領域

本發明涉及一種基因工程領域，尤其涉及一種人的NADH脫氫酶(輔酶Q)1，α/β亞復合突變蛋白及其應用。

背景技術

還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(reduced form of nicotinamide edeninedinucleotide，NADH)脫氫酶位于線粒體內膜，是三羧酸循環的一個重要的酶，由43個蛋白組成，其中有7個是由線粒體基因組編碼，其他的由核基因組編碼。目前的研究提示，NADH脫氫酶(輔酶Q)1，α/β亞復合物(NADH dehydrogenase(ubiquinone)1,alpha/betasubcomplex)基因表達增高與線粒體缺陷和氧化應激密切相關，對NADH脫氫酶(輔酶Q)1，α/β亞復合物在白血病患者中的作用進行研究，以期獲取NADH脫氫酶(輔酶Q)1，α/β亞復合物對白血病的治療的積極作用。

發明內容

本發明目的在于提供一種人的NADH脫氫酶(輔酶Q)1，α/β亞復合突變蛋白及其應用。

本發明技術方案包括：

第一方面，提供一種人的NADH脫氫酶(輔酶Q)1，α/β亞復合突變蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。

第二方面，提供一種人的NADH脫氫酶(輔酶Q)1，α/β亞復合的突變蛋白的編碼基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。

第三方面，提供一種基因芯片，包括：固相載體和固定在該載體上的核苷酸探針；所述核苷酸探針根據上述所述人的NADH脫氫酶(輔酶Q)1，α/β亞復合突變蛋白的核苷酸序列，與人的NADH脫氫酶(輔酶Q)1，α/β亞復合正常蛋白的核苷酸序列的比對結果確定。

優選地，所述核苷酸探針為SEQ ID NO:3所示的堿基序列；

所述核苷酸探針為SEQ ID NO:4所示的堿基序列；

所述核苷酸探針為SEQ ID NO:5所示的堿基序列。

第四方面，提供一種試劑，所述試劑中含有用于檢測上述人的NADH脫氫酶(輔酶Q)1，α/β亞復合突變蛋白的引物對。

優選地，所述引物對包括下述任一上游引物與下述任一下游引物的組合：

上游引物為如SEQ ID NO:8～NO:18中任一所示的堿基序列；

下游引物為如SEQ ID NO:19～NO:23中任一所示的堿基序列。

第五方面，提供一種特異性識別人的NADH脫氫酶(輔酶Q)1，α/β亞復合突變蛋白的單克隆抗體，由上述的試劑制備而成，其可與SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列特異性結合。

第六方面，提供一種用于檢測人的NADH脫氫酶(輔酶Q)1，α/β亞復合突變蛋白的ELISA試劑盒，所述ELISA試劑盒包括：包被有上述單克隆抗體的ELISA酶標板、酶標二抗、樣品稀釋液、包被緩沖液、ELISA酶標板洗滌液、顯色液和終止液。

優選地，所述酶標二抗為稀釋的HRP辣根過氧化物酶標記的山羊抗人IgG。