[發明專利]一種人的黃素還原酶突變蛋白及其應用

在審

• 申請號: 201811054335.6
• 申請日: 2018-09-11
• 公開（公告）號: CN109207447A
• 公開（公告）日: 2019-01-15
• 發明（設計）人: 張耀洲;吳玉乾;馮建華;李冬梅;張樹軍;陳玉皎;王文雅
• 申請（專利權）人: 天津市湖濱盤古基因科學發展有限公司
• 主分類號: C12N9/06
• 分類號: C12N9/06;C12N15/53;C07K16/40;C12Q1/6886;C40B40/08;C12N15/11;G01N33/577;G01N33/573;G01N33/574
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本發明涉及一種人的黃素還原酶突變蛋白及其應用，將若干胰腺癌患者作為研究病例，對病例進行基因檢測并分析，確定出人的黃素還原酶的突變蛋白，根據該人的黃素還原酶突變蛋白制備基因芯片、單克隆抗體和ELISA試劑盒，為胰腺癌的基因診斷提供指引作用，為實現胰腺癌的診斷和治療提供科學基礎。

技術領域

本發明涉及一種基因工程領域，尤其涉及一種人的黃素還原酶突變蛋白及其應用。

背景技術

黃素還原酶(flavin reductase)是一種特異性的氧化還原酶，用于催化多種黃素煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate，NADPH)依賴的還原，例如，核黃素、腺嘌呤黃素(Flavine adenine dinucleotide，FAD)、黃素單核苷酸(Flavin Mononucleotide，FMN)、膽綠素、高鐵血紅蛋白和吡咯并喹啉醌(Pyrroloquinoline quinone，PQQ)。還參與亞鐵血紅素和線性四吡咯的分解代謝。在FMN和NADPH存在下，可以將復雜的Fe³⁺還原生成Fe²⁺。近期研究表明，胰腺癌的發生與黃素還原酶的突變有一定關系，因此，對人的黃素還原酶進行檢測，以及對黃素還原酶突變蛋白的應用，可以為胰腺癌的檢測和治療起到積極作用。

發明內容

本發明目的在于提供一種人的黃素還原酶突變蛋白及其應用。

本發明技術方案包括：

第一方面，提供一種人的黃素還原酶突變蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。

第二方面，提供一種人的黃素還原酶的突變蛋白的編碼基因，其核苷酸序列如SEQID NO:2所示。

第三方面，提供一種基因芯片，包括：固相載體和固定在該載體上的核苷酸探針；所述核苷酸探針根據上述所述人的黃素還原酶突變蛋白的核苷酸序列，與人的黃素還原酶正常蛋白的核苷酸序列的比對結果確定。

優選地，所述核苷酸探針為SEQ ID NO:3所示的堿基序列；

所述核苷酸探針為SEQ ID NO:4所示的堿基序列；

所述核苷酸探針為SEQ ID NO:5所示的堿基序列。

第四方面，提供一種試劑，所述試劑中含有用于檢測上述人的黃素還原酶突變蛋白的引物對。

優選地，所述引物對包括下述任一上游引物與下述任一下游引物的組合：

上游引物為如SEQ ID NO:8～NO:19中任一所示的堿基序列；

下游引物為如SEQ ID NO:20～NO:25中任一所示的堿基序列。

第五方面，提供一種特異性識別人的黃素還原酶突變蛋白的單克隆抗體，由上述的試劑制備而成，其可與SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列特異性結合。

第六方面，提供一種用于檢測人的黃素還原酶突變蛋白的ELISA試劑盒，所述ELISA試劑盒包括：包被有上述單克隆抗體的ELISA酶標板、酶標二抗、樣品稀釋液、包被緩沖液、ELISA酶標板洗滌液、顯色液和終止液。

優選地，所述酶標二抗為稀釋的HRP辣根過氧化物酶標記的山羊抗人IgG。

本發明提供了一種人的黃素還原酶突變蛋白及其應用，將若干胰腺癌患者作為研究病例，對病例進行基因檢測并分析，確定出人的黃素還原酶的突變蛋白，根據該人的黃素還原酶突變蛋白制備基因芯片、單克隆抗體和ELISA試劑盒，為胰腺癌的基因診斷提供指引作用，為實現胰腺癌的診斷和治療提供科學基礎。