[發明專利]一種人的N-乙酰神經氨酸裂合酶突變蛋白及其應用

在審

• 申請號: 201811054290.2
• 申請日: 2018-09-11
• 公開（公告）號: CN109251920A
• 公開（公告）日: 2019-01-22
• 發明（設計）人: 張耀洲;吳玉乾;馮建華;李冬梅;張樹軍;陳玉皎;王文雅
• 申請（專利權）人: 天津市湖濱盤古基因科學發展有限公司
• 主分類號: C12N9/88
• 分類號: C12N9/88;C12N15/60;C07K16/40;C12Q1/6886;C40B40/08;G01N33/577;G01N33/574;G01N33/573
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• 代理人: 暫無信息

本發明涉及一種人的N?乙酰神經氨酸裂合酶突變蛋白及其應用，將若干腫瘤患者作為研究病例，對病例進行基因檢測并分析，確定出人的N?乙酰神經氨酸裂合酶的突變蛋白，根據該人的N?乙酰神經氨酸裂合酶突變蛋白制備基因芯片、單克隆抗體和ELISA試劑盒，為腫瘤的基因診斷提供指引作用，為實現腫瘤的診斷和治療提供科學基礎。

技術領域

本發明涉及一種基因工程領域，尤其涉及一種人的N-乙酰神經氨酸裂合酶突變蛋白及其應用。

背景技術

N-乙酰神經氨酸裂合酶(N-acetylneuraminate lyase)是裂解酶的一種，在一定條件下，該酶可以將N-乙酰神經氨酸裂解成N-乙酰甘露糖胺和丙酮酸，又能催化ManNAc和Pyr羥醛縮合生成N-乙酰神經氨酸。N-乙酰神經氨酸裂合酶，是唾液酶代謝的末端酶。該酶在高等動物及一些微生物中都有存在。在動物體內，該酶主要是控制唾液酸的循環。唾液酸的含量測定對多種疾病的診斷、治療具有重要意義，例如腫瘤。因此，對人的N-乙酰神經氨酸裂合酶的檢測和研究，可以對腫瘤的檢測和治療起到積極作用。

發明內容

本發明目的在于提供一種人的N-乙酰神經氨酸裂合酶突變蛋白及其應用。

本發明技術方案包括：

第一方面，提供一種人的N-乙酰神經氨酸裂合酶突變蛋白，其氨基酸序列如SEQID NO:1所示。

第二方面，提供一種人的N-乙酰神經氨酸裂合酶的突變蛋白的編碼基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。

第三方面，提供一種基因芯片，包括：固相載體和固定在該載體上的核苷酸探針；所述核苷酸探針根據上述所述人的N-乙酰神經氨酸裂合酶突變蛋白的核苷酸序列，與人的N-乙酰神經氨酸裂合酶正常蛋白的核苷酸序列的比對結果確定。

優選地，所述核苷酸探針為SEQ ID NO:3所示的堿基序列；

所述核苷酸探針為SEQ ID NO:4所示的堿基序列；

所述核苷酸探針為SEQ ID NO:5所示的堿基序列。

第四方面，提供一種試劑，所述試劑中含有用于檢測上述人的N-乙酰神經氨酸裂合酶突變蛋白的引物對。

優選地，所述引物對包括下述任一上游引物與下述任一下游引物的組合：

上游引物為如SEQ ID NO:8～NO:10中任一所示的堿基序列；

下游引物為如SEQ ID NO:11～NO:31中任一所示的堿基序列。

第五方面，提供一種特異性識別人的N-乙酰神經氨酸裂合酶突變蛋白的單克隆抗體，由上述的試劑制備而成，其可與SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列特異性結合。

第六方面，提供一種用于檢測人的N-乙酰神經氨酸裂合酶突變蛋白的ELISA試劑盒，所述ELISA試劑盒包括：包被有上述單克隆抗體的ELISA酶標板、酶標二抗、樣品稀釋液、包被緩沖液、ELISA酶標板洗滌液、顯色液和終止液。

優選地，所述酶標二抗為稀釋的HRP辣根過氧化物酶標記的山羊抗人IgG。

本發明提供了一種人的N-乙酰神經氨酸裂合酶突變蛋白及其應用，將若干腫瘤患者作為研究病例，對病例進行基因檢測并分析，確定出人的N-乙酰神經氨酸裂合酶的突變蛋白，根據該人的N-乙酰神經氨酸裂合酶突變蛋白制備基因芯片、單克隆抗體和ELISA試劑盒，為腫瘤的基因診斷提供指引作用，為實現腫瘤的診斷和治療提供科學基礎。

上述說明僅是本發明技術方案的概述，為了能夠更清楚了解本發明的技術手段，并可依照說明書的內容予以實施，以下以本發明的較佳實施例并配合附圖詳細說明如后。

附圖說明