[發(fā)明專利]一種人的尿卟啉原脫羧酶突變蛋白及其應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201811053845.1
• 申請(qǐng)日: 2018-09-11
• 公開（公告）號(hào): CN109251918A
• 公開（公告）日: 2019-01-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張耀洲;吳玉乾;馮建華;李冬梅;張樹軍;陳玉皎;王文雅
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 天津市湖濱盤古基因科學(xué)發(fā)展有限公司
• 主分類號(hào): C12N9/88
• 分類號(hào): C12N9/88;C12N15/60;C12Q1/6883;C07K16/40;G01N33/577;G01N33/573
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發(fā)明涉及一種人的尿卟啉原脫羧酶突變蛋白及其應(yīng)用，將若干卟啉癥患者作為研究病例，對(duì)病例進(jìn)行基因檢測(cè)并分析，確定出人的尿卟啉原脫羧酶的突變蛋白，根據(jù)該人的尿卟啉原脫羧酶突變蛋白制備基因芯片、單克隆抗體和ELISA試劑盒，為卟啉癥的基因診斷提供指引作用，為實(shí)現(xiàn)卟啉癥的診斷和治療提供科學(xué)基礎(chǔ)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種基因工程領(lǐng)域，尤其涉及一種人的尿卟啉原脫羧酶突變蛋白及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

尿卟啉原脫羧酶(uroporphyrinogen decarboxylase)是血紅素合成的一個(gè)關(guān)鍵調(diào)控酶，其中血紅素廣泛存在于血液、骨髓和肝臟等重要器官中，能吸引抗腫瘤的藥物聚集到癌變組織，從而減少放療和化療對(duì)正常組織的傷害。尿卟啉原脫羧酶發(fā)生突變，則無法實(shí)現(xiàn)對(duì)血紅素的調(diào)控，使得血紅素的合成受到影響，進(jìn)而引發(fā)卟啉癥。檢測(cè)尿卟啉原脫羧酶是否發(fā)生突變，以及對(duì)突變的尿卟啉原脫羧酶的應(yīng)用，可以對(duì)卟啉癥的檢測(cè)和治療起到積極作用。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明目的在于提供一種人的尿卟啉原脫羧酶突變蛋白及其應(yīng)用。

本發(fā)明技術(shù)方案包括：

第一方面，提供一種人的尿卟啉原脫羧酶突變蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。

第二方面，提供一種人的尿卟啉原脫羧酶的突變蛋白的編碼基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。

第三方面，提供一種基因芯片，包括：固相載體和固定在該載體上的核苷酸探針；所述核苷酸探針根據(jù)上述所述人的尿卟啉原脫羧酶突變蛋白的核苷酸序列，與人的尿卟啉原脫羧酶正常蛋白的核苷酸序列的比對(duì)結(jié)果確定。

優(yōu)選地，所述核苷酸探針為SEQ ID NO:3所示的堿基序列；

所述核苷酸探針為SEQ ID NO:4所示的堿基序列；

所述核苷酸探針為SEQ ID NO:5所示的堿基序列。

第四方面，提供一種試劑，所述試劑中含有用于檢測(cè)上述人的尿卟啉原脫羧酶突變蛋白的引物對(duì)。

優(yōu)選地，所述引物對(duì)包括下述任一上游引物與下述任一下游引物的組合：

上游引物為如SEQ ID NO:8～NO:16中任一所示的堿基序列；

下游引物為如SEQ ID NO:17～NO:37中任一所示的堿基序列。

第五方面，提供一種特異性識(shí)別人的尿卟啉原脫羧酶突變蛋白的單克隆抗體，由上述的試劑制備而成，其可與SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列特異性結(jié)合。

第六方面，提供一種用于檢測(cè)人的尿卟啉原脫羧酶突變蛋白的ELISA試劑盒，所述ELISA試劑盒包括：包被有上述單克隆抗體的ELISA酶標(biāo)板、酶標(biāo)二抗、樣品稀釋液、包被緩沖液、ELISA酶標(biāo)板洗滌液、顯色液和終止液。

優(yōu)選地，所述酶標(biāo)二抗為稀釋的HRP辣根過氧化物酶標(biāo)記的山羊抗人IgG。

本發(fā)明提供了一種人的尿卟啉原脫羧酶突變蛋白及其應(yīng)用，將若干卟啉癥患者作為研究病例，對(duì)病例進(jìn)行基因檢測(cè)并分析，確定出人的尿卟啉原脫羧酶的突變蛋白，根據(jù)該人的尿卟啉原脫羧酶突變蛋白制備基因芯片、單克隆抗體和ELISA試劑盒，為卟啉癥的基因診斷提供指引作用，為實(shí)現(xiàn)卟啉癥的診斷和治療提供科學(xué)基礎(chǔ)。

上述說明僅是本發(fā)明技術(shù)方案的概述，為了能夠更清楚了解本發(fā)明的技術(shù)手段，并可依照說明書的內(nèi)容予以實(shí)施，以下以本發(fā)明的較佳實(shí)施例并配合附圖詳細(xì)說明如后。

附圖說明

圖1是本發(fā)明實(shí)施例一提供的一種比對(duì)結(jié)果示意圖；

圖2是本發(fā)明實(shí)施例一提供的一種基因芯片布局圖；