[發明專利]一種用木質素原位修飾金芯片的方法

有效

• 申請號: 201811053639.0
• 申請日: 2018-09-04
• 公開（公告）號: CN109187957B
• 公開（公告）日: 2021-06-18
• 發明（設計）人: 宋君龍;王沛沛;楊益琴;吳淑芳;王志國;任浩;金永燦;戴紅旗
• 申請（專利權）人: 南京林業大學
• 主分類號: G01N33/543
• 分類號: G01N33/543;G01N33/68;G01N21/552;G01N29/02
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種木質素原位修飾金芯片的方法，其特征在于包括如下步驟：

步驟(1)：所用芯片為金表面的石英晶體微天平或表面等離子共振儀芯片，實驗前將金芯片清洗后用氮氣吹干，然后放入紫外-臭氧清洗機照射10-30min；

步驟(2)：用75％乙醇為溶劑配制40mM的11-巰基十一烷酸與3-巰基丙酸；

步驟(3)：用pH為7.4的0.05mM的磷酸鹽緩沖溶液配制2mM的1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽和5mM的N-羥基硫代琥珀酰亞胺鈉鹽的溶液，和50μg/ml的牛血清蛋白液體、纖維素酶液體和木質素磺酸鹽液體；

步驟(4)：將步驟(1)清洗并照射后的芯片放置在石英晶體微天平或表面等離子共振儀流動池內；

步驟(5)：首先以0.1ml/min的流速通入75％的乙醇溶液把基線走平；

步驟(6)：待平穩后，把步驟(2)中配制的3-巰基丙酸和11-巰基十一烷酸溶液按體積比10∶1的比例混合后，以0.1ml/min的流速通入石英晶體微天平或表面等離子共振儀流動池，待檢測信號平衡后通入75％乙醇沖洗；

步驟(7)：接下來把步驟(3)中配制的1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽和N-羥基硫代琥珀酰亞胺鈉鹽溶液以體積比1∶1混合，然后以0.1ml/min的流速通入系統，15min后停止通液體；

步驟(8)：一小時后重新啟動泵，以0.1ml/min的流速通入pH為7.4的0.05mM的磷酸鹽緩沖溶液；

步驟(9)：待信號平穩后以0.1ml/min的流速通入步驟(3)配制的牛血清蛋白溶液或者纖維素酶溶液，待吸附平衡后通入磷酸鹽緩沖溶液沖洗去未牢固結合的牛血清蛋白或纖維素酶；

步驟(10)：以0.1ml/min的流速通入步驟(3)配制的木質素磺酸鹽液體，最后得到木質素原位修飾的金芯片。