[發明專利]一種用于類風濕性關節炎診斷的microRNA生物標志物及其應用

有效

• 申請號: 201811051744.0
• 申請日: 2018-09-10
• 公開（公告）號: CN109022568B
• 公開（公告）日: 2021-04-30
• 發明（設計）人: 雷署豐;朱曉煒;武龍飛;鄧飛艷;莫興波
• 申請（專利權）人: 蘇州大學
• 主分類號: C12Q1/6883
• 分類號: C12Q1/6883;C12N15/113
• 代理公司: 蘇州市中南偉業知識產權代理事務所(普通合伙) 32257
• 代理人: 馮瑞;楊慧林

本發明公開了一種用于類風濕性關節炎診斷的microRNA生物標志物及其應用，屬于生物檢測技術領域。本發明所提供的這3個microRNA生物標志物及其相應引物組和探針可以用于制備診斷試劑盒，且其在應用于外周血單個核細胞樣本的類風濕性關節炎診斷時，具有優異的靈敏度與特異性。本發明3種microRNA聯合起來的AUC值可以達到0.745，靈敏度和特異性分別為73.5％和76.7％。這3種microRNA可以作為人的類風濕性關節炎外周血單個核細胞樣本診斷的生物標志物，有利于推動我國類風濕性關節炎的早期診斷、預測治療、監測復發的發展。

技術領域

本發明涉及一種用于類風濕性關節炎診斷的microRNA生物標志物及其應用，屬于生物檢測技術領域。

背景技術

類風濕性關節炎(rheumatoid arthritis，RA)是一種以侵蝕性關節炎為主要表現的慢性全身性自身免疫性疾病。全球目前約有1％的人群罹患該疾病，其中發達國家患病率為0.5-1％，每年新發病例為5-50/10萬，中國大陸地區患病率為0.2-0.36％，患病總數超過500萬。臨床多表現為對稱性、持續性關節腫脹和疼痛，常伴有骨丟失、骨侵蝕，關節軟骨的丟失，滑膜炎癥及關節囊腫脹?；颊呷绮粚Σ∏橛枰钥刂?，則會逐漸引起肌肉與骨骼不健全、身體機能減退及誘發共生疾病，晚期致殘率較高，嚴重影響患者的生活質量，并伴隨沉重的社會經濟負擔。因此篩查RA的新型生物標志物，揭示其分子致病機制，建立早期疾病診斷模型和預防手段是控制RA免疫炎癥、預防并減緩后期骨骼損傷或畸形的極為重要的戰略措施。

目前關于RA的發病原理和機制尚未明確，但普遍認為RA是一種由環境因素和遺傳因素共同調控的復雜疾病。其中遺傳因素是RA發病的重要影響因素，在RA發病中所占比重約為50-60％。先前的全基因組關聯研究已發現100多個與RA相關的易感基因，且其中多數與免疫相關。但目前有關RA發病的分子機制尚未研究成熟，已發現的遺傳學易感位點聯合起來解釋RA遺傳率很小(15％)，仍有大量的遺傳因子有待發現。表觀遺傳修飾是許多疾病發生及發展的重要影響因素，參與影響復雜疾病的晚發、性別間差異、癥狀波動等。microRNA(miRNA)作為表觀遺傳修飾的重要組成部分，對基因組多個水平發揮作用，表現為調控DNA甲基化等其余表觀遺傳因素，以及通過招募特定的蛋白復合物結合啟動子來修飾蛋白編碼的基因的表達。

研究顯示人體內1/3的基因受到miRNA的調控，它不僅與正常細胞的增殖、分化、凋亡、應激、脂肪代謝、生長發育和心臟的功能調控等密切相關，同時也與惡性腫瘤以及心血管疾病等復雜疾病的發生發展密切相關。已有報道顯示作為表觀遺傳修飾中重要的一環，miRNA在RA的發病機制中發揮著重要的作用。它能通過對基因的靶向調控，參與影響多條RA相關的細胞因子信號通路及免疫炎癥反應，或者直接對CD4⁺T細胞等免疫細胞、滑膜成纖維細胞或滑膜組織、關節骨骼等產生影響，進而引起RA疾病的發生與發展。

外周血單個核細胞中含有一系列與免疫相關的細胞，如T細胞、B細胞、單核細胞等，因此目前多數針對RA的功能組學研究是以外周血單個核細胞為研究靶細胞。在外周血單個核細胞中篩選出RA中異常表達的miRNA作為生物標志物，并研制相應的輔助診斷試劑盒，將有力推動我國RA的早期診斷、預測治療、監測復發等，具有重要的臨床應用價值。

發明內容

為解決上述技術問題，提供一種用于類風濕性關節炎診斷的外周血單個核細胞microRNA生物標志物。同時提供一種能夠用于早期檢測且在檢測時具有較高靈敏度和較高特異性的類風濕性關節炎檢測試劑盒及其應用。

本發明的第一個目的是提供一種用于類風濕性關節炎診斷的microRNA生物標志物，所述的microRNA生物標志物為has-miR-99b-5p、has-miR-26b-5p或has-miR-7641中的任意一種或一種以上的組合。