[發明專利]一種提高斜生柵藻中葉黃素產量的方法

在審

• 申請號: 201811049786.0
• 申請日: 2018-09-10
• 公開（公告）號: CN109182437A
• 公開（公告）日: 2019-01-11
• 發明（設計）人: 傅鵬程
• 申請（專利權）人: 浙江山諾生物科技有限公司
• 主分類號: C12P23/00
• 分類號: C12P23/00;C12R1/89
• 代理公司: 北京七夏專利代理事務所(普通合伙) 11632
• 代理人: 王彥麗

本發明申請屬于斜生柵培養技術領域，具體公開了一種提高斜生柵藻中葉黃素產量的方法，具體包括以下步驟,步驟一：(1)培養：采用混養方式對斜生柵進行培養；(2)培養時在混養條件下，以葡萄糖作為有機碳源，葡萄糖濃度為15g/l；(3)接種：初次接種量控制在20％；(4)培養時采用BG11培養基進行培養，ph數值控制在7?9；步驟二：在步驟一培養進入穩定期后，將進入對數期末期的藻體轉入脅迫條件中培養，向培養基中加入若干脅迫因素，所述脅迫因素包括：NaNO3和K2HPO3；其中，添加的NaNO3其濃度為1.5g/L，添加的K2HPO3其濃度為0.01g/L，控制脅迫溫度為45攝氏度并且持續4h。本方法能夠可以通過優化培養條件和提取工藝達到增加產量的目的。

技術領域

本發明屬于斜生柵培養技術領域，具體公開了一種提高斜生柵藻中葉黃素產量的方法。

背景技術

斜生柵是一種常見的真核綠藻，廣泛應用于生產生物柴油和污水處理等領域，近年來由于國際油價下跌，生物柴油競爭力下降，微藻的研究重點逐漸從產油轉到對類胡蘿卜素、多不飽和脂肪酸、維生素等高附加值產物上。大量資料表明斜生柵類胡蘿卜素含量豐富，其中大部分是葉黃素。葉黃素有很高的藥用價值和保健價值，市場出現供不應求的局面，前景非常廣闊。

目前市場上的葉黃素產品主要采用萬壽菊等植物為原料提取獲得。微藻生長迅速，葉黃素含量高，節約土地和水源，和萬壽菊相比有很多優勢，很多學者認為微藻是最有希望替代萬壽菊成為新的葉黃素原料的。限制藻類工業化生產葉黃素的主要瓶頸還是在于細胞密度低、葉黃素產量不夠,及提取工藝成本高。

目前小球藻是國內外研究的熱點，小球藻不易培育而斜生柵(斜生柵是柵藻的一種)易繁殖但是卻很少有利用斜生柵生產葉黃素的研究，因此如何以斜生柵作為葉黃素原料提取葉綠素并且優化提取工藝提高產量是本領域技術人員需要解決的問題。

發明內容

本發明的目的在于提供一種能夠提高斜生柵藻中葉黃素產量的方法，可以通過優化培養條件和提取工藝達到增加產量的目的。

為了達到上述目的，本發明的基礎方案為：

一種提高斜生柵藻中葉黃素產量的方法，具體包括以下步驟,

具體包括以下步驟,

步驟一：

(1)培養：采用混養方式對斜生柵進行培養；

(2)培養時在混養條件下，以葡萄糖作為有機碳源，葡萄糖濃度為15g/l；

(3)接種：初次接種量控制在20％；

(4)培養時采用BG11培養基進行培養，ph數值控制在7-9；

步驟二：

在步驟一培養進入穩定期后，向培養基中加入若干脅迫因素，所述脅迫因素包括：NaNO3和K2HPO3；其中，添加的NaNO3其濃度為1-2g/L，添加的K2HPO3其濃度為0.01g/L，控制脅迫溫度為45攝氏度并且持續4h。

本基礎方案的工作原理和有益效果在于：

BG-11培養基廣泛適用于淡水斜生柵培養；斜生柵在混養條件下斜生柵生長迅速，生物量和葉黃素產量遠遠高于自養和異養，因此確定采用混養營養方式；混養條件下的最佳有機碳源是葡萄糖，15g/L為最佳葡萄糖濃度；初始接種量為20％，柵藻最容易存活且快速生長；柵藻在中性、弱酸性和弱堿性的環境能夠存，此時葉黃素產量也最高。經第一步培養進入穩定期后由于營養消耗和環境因素的改變，柵藻的生物量及葉黃素產量不再上升，柵藻生長的最適條件通常和葉黃素積累的最適條件不同，將進入對數期末期的藻體轉入脅迫條件中培養，在大量的生物量基礎上達到大量積累葉黃素的目的；脅迫因素對生物量和葉黃素積累的影響不同，氮、磷和溫度的影響較大，最適合葉黃素積累的NaNO3、K2HPO3。