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[發(fā)明專利]MIF作為早期帕金森病診斷的生物標(biāo)志物在制備帕金森病診斷試劑中的用途在審

專利信息
申請(qǐng)?zhí)枺?/td> 201811047997.0 申請(qǐng)日: 2018-09-10
公開(公告)號(hào): CN109212228A 公開(公告)日: 2019-01-15
發(fā)明(設(shè)計(jì))人: 廖亞金 申請(qǐng)(專利權(quán))人: 南京昂科利醫(yī)藥科技創(chuàng)新研究院有限公司
主分類號(hào): G01N33/68 分類號(hào): G01N33/68
代理公司: 暫無信息 代理人: 暫無信息
地址: 210000 江蘇省南京市江寧*** 國省代碼: 江蘇;32
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摘要:
搜索關(guān)鍵詞: 帕金森病診斷 巨噬細(xì)胞遷移抑制因子 生物標(biāo)志物 制備 帕金森病 身體狀況 學(xué)歷背景 樣本采集 微創(chuàng) 無創(chuàng) 診斷 檢測(cè)
【說明書】:

發(fā)明公開了巨噬細(xì)胞遷移抑制因子(MIF)作為早期帕金森病診斷的生物標(biāo)志物在制備帕金森病診斷試劑中的用途。采用巨噬細(xì)胞遷移抑制因子(MIF)診斷早期帕金森病適用于無創(chuàng)/微創(chuàng)樣本采集方案;適合多種學(xué)歷背景和身體狀況的受檢者;而且價(jià)格僅為50元左右,適合推廣的檢測(cè)方法。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種用于診斷帕金森病的血液生物標(biāo)志物,屬于生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

帕金森病是一種嚴(yán)重威脅中老年人健康和生活質(zhì)量的神經(jīng)退行性疾病和運(yùn)動(dòng)障礙性疾病。帕金森病臨床表現(xiàn)為運(yùn)動(dòng)遲緩、肌緊張和靜止性震顫,以及進(jìn)行性認(rèn)知功能減退。迄今為止,臨床尚無可治愈帕金森病的手段,且其發(fā)病率逐年增加,因而早診斷早干預(yù)是目前學(xué)界的共識(shí)。臨床也迫切需要無創(chuàng)或微創(chuàng),靈敏特異,成本低的早期診斷方法。

臨床病理分析結(jié)果提示早在帕金森病臨床癥狀出現(xiàn)20年前,患者腦部就開始出現(xiàn)小膠質(zhì)細(xì)胞激活和多巴胺能神經(jīng)元丟失。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是克服帕金森病早期很難診斷的缺陷,提供一種用于診斷帕金森病的血液生物標(biāo)志物。

為了解決上述技術(shù)問題,本發(fā)明提供了如下的技術(shù)方案:

巨噬細(xì)胞遷移抑制因子(MIF)作為早期帕金森病診斷的生物標(biāo)志物在制備帕金森病診斷試劑中的用途。

一種通過檢測(cè)巨噬細(xì)胞遷移抑制因子(MIF)診斷早期帕金森病的方法,包括以下步驟:

1)、獲取組織樣本,檢測(cè)巨噬細(xì)胞遷移抑制因子水平;

2)、將所檢測(cè)到的巨噬細(xì)胞遷移抑制因子(MIF)的水平與正常水平進(jìn)行比較。

優(yōu)選的,組織樣本為血漿或血清樣本。

一種通過檢測(cè)巨噬細(xì)胞遷移抑制因子(MIF)診斷早期帕金森病的試劑盒,其包括:MIF標(biāo)準(zhǔn)品、封閉液、稀釋液、生物素標(biāo)記的檢測(cè)MIF抗體、HRP標(biāo)記的鏈霉親和素、包被有MIF檢測(cè)抗體的酶標(biāo)板、底物顯色液A和底物顯色液B。

本發(fā)明所達(dá)到的有益效果是:采用巨噬細(xì)胞遷移抑制因子(MIF)診斷早期帕金森病適用于無創(chuàng)/微創(chuàng)樣本采集方案;適合多種學(xué)歷背景和身體狀況的受檢者;而且價(jià)格僅為50元左右,適合推廣的檢測(cè)方法。

附圖說明

附圖用來提供對(duì)本發(fā)明的進(jìn)一步理解,并且構(gòu)成說明書的一部分,與本發(fā)明的實(shí)施例一起用于解釋本發(fā)明,并不構(gòu)成對(duì)本發(fā)明的限制。在附圖中:

圖1是本發(fā)明實(shí)施例中模型組小鼠腦組織紋狀體中的巨噬細(xì)胞遷移抑制因子(MIF)的蛋白質(zhì)免疫印跡結(jié)果;

圖2是PD病人血清中的巨噬細(xì)胞遷移抑制因子(MIF)的酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)結(jié)果。

具體實(shí)施方式

以下結(jié)合附圖對(duì)本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例進(jìn)行說明,應(yīng)當(dāng)理解,此處所描述的優(yōu)選實(shí)施例僅用于說明和解釋本發(fā)明,并不用于限定本發(fā)明。

實(shí)施例

本方案采用國際通用的慢性帕金森病模型,步驟為:①8周齡雄性C57BL小鼠40只,隨機(jī)分為兩組,每組20只,一組注射生理鹽水,一組注射1-甲基-4-苯基-1,2,4,5-四氫吡啶(MPTP),25mg/kg劑量注射,每周注射2次,連續(xù)注射5周;本方案在注射第四周時(shí),即小鼠為12周齡時(shí)處死小鼠,取樣,通過蛋白質(zhì)免疫印跡方法檢測(cè)紋狀體區(qū)MIF的表達(dá)量。

蛋白質(zhì)免疫印跡步驟:

①組織/細(xì)胞蛋白提取

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