[發明專利]一株解磷耐鹽的熒光假單胞菌菌株及其培養方法與應用

有效

• 申請號: 201811042282.6
• 申請日: 2018-09-07
• 公開（公告）號: CN109679858B
• 公開（公告）日: 2020-07-24
• 發明（設計）人: 張強;李進;王加寧;張友忠;任現儒
• 申請（專利權）人: 山東天暢環保科技股份有限公司;山東省科學院生態研究所
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12R1/39
• 代理公司: 濟南竹森知識產權代理事務所(普通合伙) 37270
• 代理人: 朱家富

本發明涉及一株解磷耐鹽的熒光假單胞菌菌株及其培養方法與應用。一株解磷耐鹽的熒光假單胞菌(Pseudomonas fluorescens)ECO，2018年07月13日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，地址：北京市朝陽區北辰西路1號院3號中國科學院微生物研究所，菌種保藏號：CGMCC No.16104。本發明首次公開了一株通過自然界篩選獲得的解磷耐鹽的熒光假單胞菌ECO，該菌株與現有已知的熒光假單胞菌相比，耐鹽性方面具有顯著的優勢，可應用于高鹽堿環境下的解磷及土壤改良。

技術領域

本發明涉及一株解磷耐鹽的熒光假單胞菌菌株及其培養方法與應用，屬于微生物技術領域。

背景技術

熒光假單胞菌(Pseudomonas fluorescens)是一種環境污染菌。對于人類是一種罕見的機會致病菌。熒光假單胞菌屬于假單胞菌屬，是化能異養型的革蘭氏陰性菌，呈桿狀，有鞭毛。能分泌黃綠色熒光色素發出熒光，能產生抗生素、水解酶等代謝產物，在4℃-37℃范圍內，中性環境中生長，生理生化特性顯著，作為嗜冷菌是牛奶中危害最大的微生物。

熒光假單胞菌分類學上屬于細菌域、變形菌門、γ-變形菌綱、假單胞菌目、假單胞菌科的假單胞菌屬。細胞為直的桿菌，大小為0.7-0.8×2.3-2.8微米，不產芽孢，革蘭氏染色陰性。有數根極生鞭毛，運動。需氧，進行嚴格的呼吸型代謝，以氧為最終電子受體。能以硝酸鹽為替代的電子受體進行厭氧呼吸。化能營養異養，不需要有機生長因子。氧化酶陽性，接觸酶陽性。能利用葡萄糖和果糖，有些菌株能從蔗糖合成果聚糖，明膠液化。生長溫度范圍4-37℃，最適生長溫度是25-30℃。DNA中G+C含量是60-61％。廣泛分布于自然界，如土壤、水、植物及動物活動環境中。該菌生化能力活躍，可降解許多人工合成化合物，常被用于環境保護。

解磷菌，又稱溶磷菌，是指土壤中具有能將植物難以吸收利用的磷轉化為可吸收利用的形態這種能力的微生物。土壤磷素循環是以微生物活動為中心的。微生物的活動對土壤磷的轉化和有效性影響很大。目前，報道具有解磷作用的微生物解磷細菌類有芽孢桿菌(Bacillus)、假單胞桿菌(Pseudomonas)、歐文氏菌(Erwinia)、土壤桿菌(Agrobacterium)、沙雷氏菌(Serratia)、黃桿菌(Flavobacterium)、腸細菌(Enterbacter)、微球菌(Micrococcus)、固氮菌(Azotobacter)、根瘤菌(Bradyrhizobium)、沙門氏菌(Salmonella)、色桿菌(Clromobacterium)、產堿菌(Alcaligenes)、節細菌(Arthrobacter)、硫桿菌(Thiobacillus)、埃希氏菌(Escherichia)；解磷真菌類有青霉菌(Penicillium)、曲霉菌(Aspergillus)、根霉(Rhizopus)、鐮刀菌(Fusarium)、小菌核菌(Sclerotium)；放線菌有鏈霉菌(Streptomyces)；AM菌根菌。

鹽堿地是鹽類集積的一個種類，是指土壤里面所含的鹽分影響到作物的正常生長，根據聯合國教科文組織和糧農組織不完全統計，全世界鹽堿地的面積為9.5438億公頃，其中我國為9913萬公頃。我國堿土和堿化土壤的形成，大部分與土壤中碳酸鹽的累計有關，因而堿化度普遍較高，嚴重的鹽堿土壤地區植物幾乎不能生存。改良鹽堿地首選需要有能夠耐鹽堿的菌株對其進行土壤改良，進而使土壤中的鹽堿成分能夠達到植物能夠正常生長的程度。

中國專利文獻CN104609992A(申請號201410844584.0)公開了一種鹽堿地專用復合菌肥及該復合菌肥的制備方法，屬于復合菌肥技術領域。所述復合菌肥，包括如下重量百分比的原料組成：解磷解鉀類復合菌劑10％-20％、餐廚垃圾40％-60％、硅藻土30％-40％。其中解磷解鉀類復合菌劑是將巨大芽孢桿菌、蘇云金芽孢桿菌、熒光假單胞菌、解淀粉芽孢桿菌、膠質芽孢桿菌、圓褐固氮菌分別培養離心、冷凍干燥后等量混合獲得；餐廚垃圾是將經分揀、除雜并脫水除油的餐廚垃圾粉碎后，加入復合菌劑和混合酶制劑，好氧固態發酵后獲得。該復合菌肥將餐廚垃圾和廢棄硅藻土等廢物利用，并可從根本上改良鹽堿土。