[發明專利]一種杏仁香茶樹種質資源的篩選方法

有效

• 申請號: 201811036799.4
• 申請日: 2018-09-06
• 公開（公告）號: CN109060995B
• 公開（公告）日: 2020-05-01
• 發明（設計）人: 姜曉輝;吳華玲;方開星;陳棟;王秋霜;秦丹丹;李紅建
• 申請（專利權）人: 廣東省農業科學院茶葉研究所
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 北京科億知識產權代理事務所(普通合伙) 11350
• 代理人: 湯東鳳

本發明公開了一種杏仁香茶樹種質資源的篩選方法，包括如下步驟：挑選三份茶樹原料，其中兩份具有“杏仁香”茶樹種質資，另一份無“杏仁香”茶樹種質資，稱取50?70mg樣本，放入研磨機中研磨，取出后，超聲提取20?40min；向樣本加入100?300μL的氯仿，混合均勻后，加入水，混勻，超聲提取10?30min；向玻璃衍生小瓶中加入甲氧胺鹽酸鹽吡啶溶液，渦旋震蕩2min后，于震蕩培養箱中進行肟化反應，取出樣本后，在室溫放置30min；采集樣本數據進行GC?MS代謝組學分析。通過本發明技術方案可以快速的對茶葉代謝物中扁桃腈的含量進行快速的分析，從而可以快速的實現杏仁香茶樹種質資源的篩選工作，將原來通過4年時間選育的工作大大的縮短。

技術領域

本發明涉及茶葉種植技術領域，具體為一種杏仁香茶樹種質資源的篩選方法。

背景技術

“杏仁香”紅茶是利用一種特殊的茶樹原料加工制成的紅茶，成品茶具有杏仁奶香，這類種質資源極為稀少，且無法從茶樹的生物學形態進行辨識，因此這類茶樹種質資源進行品種選育極為困難。

目前的篩選方法為單株采集鮮葉或單株扦插繁育后分別進行紅茶加工試制，但是這兩種方法工作量極大，篩選速度均較慢。利用單株采集鮮葉加工試制的方法，由于單株茶樹茶青數量較少，加工困難，無法保持種質資源原有的特性，因此造成具有某種特性的茶樹種質資源無法篩選到，且每株茶樹單獨加工耗費人力及時間極多，效率低，而利用無性扦插育苗，對扦插苗栽培種植后再進行加工試制的方法，選育時間需要4年以上，這種大規模的扦插繁育最終可以從幾千份的茶樹種質資源中篩選到能夠加工“杏仁香”的品種，但該方法具有耗時長、成本高、工作量大等缺點。因此需要一種新的技術方案，可以快速的篩選出杏仁香茶樹品種，便于快速的種植這種稀缺品種。

發明內容

本發明的目的在于提供一種杏仁香茶樹種質資源的篩選方法，以解決上述背景技術中提出的問題。

為實現上述目的，本發明提供如下技術方案：一種杏仁香茶樹種質資源的篩選方法，其特征在于，包括如下步驟：

S1、原料選擇：挑選三份茶樹原料，其中兩份具有“杏仁香”茶樹種質資，另一份無“杏仁香”茶樹，作為對照；

S2、樣本研磨：稱取50-70mg樣本，放入研磨機中研磨，取出后，超聲提取20-40min；

S3、樣本提取：向S2中樣本加入100-300μL的氯仿，混合均勻后，加入水，混勻，超聲提取10-30min；向玻璃衍生小瓶中加入甲氧胺鹽酸鹽吡啶溶液，渦旋震蕩2min后，于震蕩培養箱中進行肟化反應，取出樣本后，在室溫放置30min；

S4、數據分析：采集樣本數據進行GC-MS代謝組學分析。

作為本發明的一種優選技術方案：在步驟S1中三份茶樹樣本均采集一芽兩葉狀態。

作為本發明的一種優選技術方案：在步驟S2中加入360μL的冷甲醇和40μL的內標置入研磨機進行研磨。

作為本發明的一種優選技術方案：在步驟S3中震蕩培養箱中溫度處于30-40℃，反應時間90min。

作為本發明的一種優選技術方案：在步驟S4中，GC-MS色譜條件：DB-5MS毛細管柱，載氣為高純氦氣，流速1.0mL/min，進樣口的溫度為260℃，進樣量1μL，分流進樣，分流比6:1，溶劑延遲5min。

作為本發明的一種優選技術方案：在步驟S4中，GC-MS質譜條件：電子轟擊離子源，離子源溫度230℃，四級桿溫度150℃，電子能量70eV，掃描方式為全掃描模式(SCAN)。

作為本發明的一種優選技術方案：所述氦氣純度不小于99.999％。

作為本發明的一種優選技術方案：質量掃描范圍：m/z 50-500。