[發(fā)明專利]抗登革病毒DE3的納米抗體、制備方法及用途

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201811036758.5
• 申請日: 2018-09-06
• 公開（公告）號: CN109320607B
• 公開（公告）日: 2021-10-08
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 胡適;崔瀛書;李天;雷長海;傅文燕
• 申請（專利權(quán)）人: 中國人民解放軍第二軍醫(yī)大學
• 主分類號: C07K16/10
• 分類號: C07K16/10;C12N15/13;C12N15/63;A61K39/42;A61P31/14
• 代理公司: 上海元一成知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 31268
• 代理人: 趙青

1.一種抗登革病毒DE3的納米抗體，其特征在于，所述納米抗體為VHH抗體，具有SEQ IDNO.1所示的氨基酸序列。

2.編碼權(quán)利要求1所述的抗登革病毒DE3的納米抗體的核苷酸，其特征在于，所述核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。

3.權(quán)利要求1所述的抗登革病毒DE3的納米抗體的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

（A）全基因合成抗登革病毒DE3的納米抗體VHH片段；

（B）采用PCR技術(shù)對步驟（A）中獲得的抗登革病毒DE3的納米抗體VHH片段進行克隆，PCR產(chǎn)物經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳純化回收并克隆到表達載體中，測序驗證后確認獲得正確的克隆；

（C）將上述表達載體引入宿主細胞內(nèi)進行融合蛋白的表達。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的抗登革病毒DE3的納米抗體的制備方法，其特征在于：

其中，在步驟（B）中，PCR所采用的引物序列如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的抗登革病毒DE3的納米抗體的制備方法，其特征在于：

其中，所述表達載體為pGEM-T、Pet32a，pcDNA3.1、pEE6.4或pEE12.4，所述表達載體中包括連接有合適的轉(zhuǎn)錄和翻譯調(diào)節(jié)序列的融合DNA序列，

所述宿主細胞為哺乳動物細胞、細菌細胞、昆蟲細胞或真菌細胞。

6.含有權(quán)利要求1所述的抗登革病毒DE3的納米抗體的藥物組合物，其特征在于，還包括藥學上可接受的藥物載體。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的抗登革病毒DE3的納米抗體的藥物組合物，其特征在于：

其中，所述藥物組合物為水針或凍干制劑，

所述藥學上可接受的藥物載體包括表面活性劑、溶液穩(wěn)定劑、等滲調(diào)節(jié)劑和緩沖液之一或組合。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的抗登革病毒DE3的納米抗體的藥物組合物，其特征在于：

其中，所述水針或凍干制劑靜脈注射的劑量是1~1800mg/天。

9.權(quán)利要求1所述的抗登革病毒DE3的納米抗體在制備抗登革熱藥物中的用途。