[發明專利]油菜硼高效基因BnA3NIP5；1Q的轉座子插入片段TEQ和引物及其應用

有效

• 申請號: 201811036323.0
• 申請日: 2018-09-06
• 公開（公告）號: CN109082425B
• 公開（公告）日: 2020-08-04
• 發明（設計）人: 徐芳森;何明亮;華營鵬;張迪迪;丁廣大;石磊;汪社亮
• 申請（專利權）人: 華中農業大學
• 主分類號: C12N15/11
• 分類號: C12N15/11;C12Q1/6895;C12N15/82;A01H5/00;A01H6/20
• 代理公司: 北京高沃律師事務所 11569
• 代理人: 劉奇

本發明提供了一種油菜硼高效基因BnA3NIP5；1^Q的轉座子插入片段TE^Q，涉及基因工程技術領域，所述轉座子插入片段TE^Q的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。本發明所述的轉座子插入片段TE^Q來源于油菜硼高效基因的BnA3NIP5；1^Q啟動子，全長1415bp，通過確定油菜中是否具有該轉座子插入片段TE^Q可快速有效的鑒別油菜是否具有抗低硼脅迫性能，加快具有高硼利用率的油菜育種速度。

技術領域

本發明涉及基因工程技術領域，具體涉及一種油菜硼高效基因 BnA3NIP5；1^Q的轉座子插入片段TE^Q及其引物和應用。

背景技術

硼是植物生長發育所必需的微量營養元素，在植物維持細胞壁的結構和 穩定、光合作用和碳水化合物運輸、蛋白質和核酸代謝、花器官發育和產量 品質形成等方面起著不可替代的作用。

油菜是中國重要的油料作物，每年種植面積在700萬公頃以上，總產 1100多萬噸，由此生產的菜籽油為中國居民提供40％以上的食用植物油、以 及大量的高蛋白餅粕飼料。中國油菜產區主要分布在長江中下游地區，占全 國種植面積的80％以上。在這一區域，土壤有效硼含量屬于缺乏或嚴重缺乏 地區。而油菜又是對缺硼反應極敏感的作物，土壤缺硼導致減產或顆粒無收。 因此，施用硼肥已成為油菜種植的常規技術。

然而，油菜對土壤有效硼濃度的適應范圍很窄，土壤連年施用硼肥，引 起土壤有效硼累積，部分區域甚至達到過量或毒害的水平，從而對油菜及其 后茬作物的生產產生不利影響。所以，通過油菜硼營養性狀的遺傳改良提高 油菜對土壤硼的吸收利用，增強油菜自身抗缺硼脅迫的能力，從而減少硼肥 過量施用帶來的風險、促進中國油菜的高產穩產，具有重要的經濟和生態意 義。

植物對土壤硼的吸收利用是受遺傳基因調控的。2002年日本科學家從擬 南芥中克隆得到第一個硼的轉運蛋白基因BOR1，該基因所編碼的是一個向 根木質部導管裝載硼的轉運蛋白，促進根從土壤吸收的硼向地上部轉運 (Takano et al.,2002)。Miwa等(2006)創建了超表達BOR1的轉基因擬南 芥株系，發現轉基因植株對缺硼脅迫的抗性顯著提高，地上部的硼含量和生 物量均顯著高于野生型植株，而且結實率也明顯提高(Miwa et al.,2006)。 擬南芥從土壤吸收硼受NIP5；1基因調控，在缺硼土壤中擬南芥NIP5；1基因 上升表達，合成的NIP5；1硼轉運蛋白定位在根表皮細胞靠土壤一側的細胞 膜上，高效地從土壤中吸收轉運硼(Takano et al.,2006；Wang et al.,2017)。 然而，目前并沒有關于利用遺傳手段有效調控相關油菜硼營養性狀的相關報 道。

發明內容

針對目前缺乏有效利用遺傳手段改善硼營養性狀油菜選育的問題，本發 明提供了一種油菜硼高效基因BnA3NIP5；1^Q的轉座子插入片段TE^Q，該轉座 子插入片段TE^Q來自于油菜硼高效基因BnA3NIP5；1^Q啟動子，以該轉座子插 入片段作為靶標檢測可快速確定油菜的抗缺硼能力，加快抗缺硼油菜育種。

本發明還提供了一種油菜硼高效基因BnA3NIP5；1^Q的轉座子插入片段 TE^Q的擴增引物，可用于抗缺硼油菜品種的育種中。

為了解決上述問題，本發明提供了以下技術方案：

本發明提供了一種油菜硼高效基因BnA3NIP5；1^Q的轉座子插入片段 TE^Q，所述轉座子插入片段TE^Q的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。