[發明專利]一種基于Janus粒子的電化學免疫傳感器及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201811034646.6
• 申請日: 2018-09-06
• 公開（公告）號: CN109116014B
• 公開（公告）日: 2021-09-28
• 發明（設計）人: 周影;楊亞娟;雙少敏;邢洋
• 申請（專利權）人: 山西大學
• 主分類號: G01N33/543
• 分類號: G01N33/543;G01N27/327
• 代理公司: 太原晉科知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 14110
• 代理人: 任林芳

1.一種基于Janus粒子的電化學免疫傳感器的檢測應用，其中以適配體/氨基作為功能化基團制備Janus粒子，并用其修飾玻碳電極表面制得所述電化學免疫傳感器，其特征在于：包括如下步驟：

第一步，用50-70%的濃硫酸，20-30%的雙氧水，按體積比3-4:1配制piranha溶液，將硅片置于該溶液中，在70-90℃下，加熱10-20min，清除硅片表面的雜質，取出，用超純水沖洗干凈，備用；

第二步，按體積比為1:1-1.2的比例，將質量分數為1-2%的氨基PS微球水溶液分散在無水乙醇中，將分散后的PS微球超聲20-40s；在培養皿中加入超純水，將超聲處理的PS微球緩慢滴加在超純水的表面，加入5-10微升十二烷基磺酸鈉溶液使PS微球排列為緊密單層，用第一步制備的硅片撈出排列為單層的PS微球，干燥后備用；

第三步，用真空熱蒸鍍儀在第二步制備的單層排列的PS微球的上表面蒸鍍20-30nm的金層后，將其迅速浸入1×10^-3-2×10^-3mol/L赭曲霉適配體溶液中，浸泡12h，用超純水沖洗硅片，除去吸附松散的赭曲霉適配體；用超聲波把修飾好的PS微球從硅片上脫離下來使其分散在pH為7的PBS緩沖液中，制備得到Janus粒子溶液，保存備用；

第四步，將羧基化石墨烯用超純水制備成0.5mg/ml溶液，超聲分散均勻，吸取分散均勻的羧基化石墨烯溶液滴涂在玻碳電極表面，用紅外燈烤干，用超純水輕輕沖洗，除去吸附松散的羧基化石墨烯，得到羧基化石墨烯修飾的玻碳電極；

第五步，將20mg 1-（3-二甲基丙基）-3-乙基碳二亞胺和10mg N-羥基琥珀酰亞胺分別加入1ml第三步得到的Janus粒子溶液中超聲30s分散均勻，然后將第四步制備的羧基化石墨烯修飾的玻碳電極浸泡在該溶液中12h后，用紅外燈烤干，用超純水輕輕沖洗，除去吸附松散Janus粒子，得到Janus粒子修飾電極；

第六步，將第五步處理的Janus粒子修飾電極在BSA溶液中浸泡2-4h后取出，用超純水沖洗，除去表面吸附松散的BSA，吹干，浸入pH為7的PBS緩沖液中，得到所述電化學免疫傳感器，備用；

第七步，將第六步制備得到的電化學免疫傳感器采用差分脈沖法對紅酒中赭曲霉毒素A進行檢測。