[發(fā)明專利]高產(chǎn)γ-氨基丁酸的誘變菌株及其生物制劑有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201811027317.9 | 申請(qǐng)日: | 2018-09-04 |
| 公開(kāi)(公告)號(hào): | CN109182171B | 公開(kāi)(公告)日: | 2021-06-29 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 張胤;李肯;趙聃 | 申請(qǐng)(專利權(quán))人: | 湖南肯基因科技有限公司 |
| 主分類號(hào): | C12N1/20 | 分類號(hào): | C12N1/20;C12N15/01;C12P13/00;A23L11/45;A23L11/65;A23L11/50;A23C9/123;C12R1/25 |
| 代理公司: | 暫無(wú)信息 | 代理人: | 暫無(wú)信息 |
| 地址: | 410000 湖南省長(zhǎng)沙市岳麓區(qū)*** | 國(guó)省代碼: | 湖南;43 |
| 權(quán)利要求書(shū): | 查看更多 | 說(shuō)明書(shū): | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 高產(chǎn) 氨基 丁酸 誘變 菌株 及其 生物制劑 | ||
1.一種通過(guò)復(fù)合誘變技術(shù)而獲得的高產(chǎn)氨基丁酸的植物乳桿菌誘變菌株(Lactobacillus plantarum)KJY12,保藏號(hào)為CGMCC No. 15422,保藏日期為2018年03月07日,保藏單位是中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心,地址北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)。
2.通過(guò)如權(quán)利要求1所述的菌株,生產(chǎn)富含GABA的食用溶液的方法,包括:
(1)將保藏的植物乳桿菌KJY12于MRS液體培養(yǎng)基中活化培養(yǎng);
(2)在豆?jié){、豆清液或米漿、豆酸奶或食用酸湯中加入0.1-0.2%重量的堿性蛋白酶或酸性蛋白酶,調(diào)整pH6.0-8.0,50℃水浴中孵育1-3h,進(jìn)行酶解;
(3)將活化的培養(yǎng)液,以108CFU /ml的濃度加入預(yù)先酶解的培養(yǎng)液中,于37℃下培養(yǎng)30-50h,獲得終發(fā)酵液;
(4)離心過(guò)濾菌液,獲得無(wú)細(xì)菌的上清液;
(5)上清液經(jīng)薄層層析和高效液相色譜分析后,當(dāng)上清液GABA的含量在29.43g/L及以上時(shí),所述終發(fā)酵液即為富含GABA的食用溶液,和/或
(6)將所有終發(fā)酵液進(jìn)行離心,獲得無(wú)乳桿菌的食用溶液;
3.權(quán)利要求2的方法,其中所述無(wú)乳桿菌的食用溶液是用于制作酸豆奶、酸奶豆腐、豆清液酸湯的溶液。
4.通過(guò)如權(quán)利要求1所述的菌株,與下列任意一種或多種誘變?nèi)樗峋赀M(jìn)行復(fù)配,以生產(chǎn)富含GABA的保健食用溶液的方法,步驟包括:
(1)將保藏的誘變菌株分別進(jìn)行活化培養(yǎng),其中,活化培養(yǎng)基選自MRS液體培養(yǎng)基,其他誘變株選自鼠李糖乳桿菌(Lactobacillus casei strain)KJY11、植物乳桿菌誘變菌株(Lactobacillus plantarum)KJY12、玉米乳桿菌(Lactobacillus zeae strain)KJY13、干酪乳桿菌(Lactobacillus casei strain)KJY14、腸膜狀明串珠菌(Leuconostocmesenteroidesstrain)KJY15;
(2)在豆?jié){、豆清液或米漿、豆酸奶或食用酸湯中加入0.1-0.2%重量的堿性蛋白酶或酸性蛋白酶,于pH6.0-8.0,50℃水浴中孵育1-3h,進(jìn)行酶解;
(3)將活化的誘變菌株培養(yǎng)液,加入預(yù)先酶解的培養(yǎng)液中,于37℃下培養(yǎng)30-50h,獲得終發(fā)酵液,其中植物乳桿菌的加入量為108CFU/ml的濃度,另外4種菌種的加入量為107CFU/ml的濃度;
(4)離心過(guò)濾菌液,獲得無(wú)細(xì)菌的上清液;
(5)經(jīng)薄層層析和高效液相色譜檢測(cè)上清液,當(dāng)酸度達(dá)到35.89g/L及以上時(shí),所述終發(fā)酵液即為富含GABA的食用溶液。
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