[發明專利]抑制產腸毒素大腸桿菌K88菌毛的fae,faeG基因表達的中藥藥物組合物及應用

有效

• 申請號: 201811026896.5
• 申請日: 2018-09-04
• 公開（公告）號: CN109223888B
• 公開（公告）日: 2021-09-10
• 發明（設計）人: 馬立保;晏向華;潘云鑫;徐保陽;晏依琴;徐曉帆;黃俊程
• 申請（專利權）人: 華中農業大學
• 主分類號: A61K36/756
• 分類號: A61K36/756;A61P1/00;A61P31/04;A61P1/12
• 代理公司: 武漢開元知識產權代理有限公司 42104
• 代理人: 樊戎;馮超

本發明公開了一種抑制產腸毒素大腸桿菌K88菌毛的fae,faeG基因表達的中藥藥物組合物及應用，它包括黃柏提取物和石榴皮提取物。本發明利用天然植物提取物抑制產腸毒素大腸桿菌菌毛的fae,faeG基因表達，降低ETEC在仔豬腸道上皮細胞的定植和繁殖，而不影響有益微生物在腸道的定植，增加了腸道有益菌的豐度，在降低仔豬發生腹瀉風險的同時，保障了腸道菌群的多樣性；同時黃柏和石榴皮中的抗氧化物質，保護仔豬斷奶應激導致的腸道氧化損傷；與抗生素相比，中藥藥物組合物不易產生耐藥性，且能克服抗生素在殺滅有害菌的同時，也降低了有益菌的豐度的副作用，更有利于生豬健康養殖，可以在臨床上作為一種飼料添加劑長期使用。

技術領域

本發明涉及藥物組合物，具體涉及一種抑制產腸毒素大腸桿菌K88菌毛的fae,faeG基因表達的中藥藥物組合物及應用。

背景技術

產腸毒素大腸桿菌(Enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)屬于腸桿菌科，埃希菌屬，大腸埃希菌種，是致病性大腸桿菌中最常見的一類。ETEC是造成仔豬腹瀉的主要致病菌，其致病性決定于在小腸上皮細胞上的定植能力和產生腸毒素的能力。腸毒素是導致腹瀉的直接原因，只有大腸桿菌黏附在小腸上皮細胞上，才能避免被腸道蠕動和腸液沖刷所清除，進而在宿主體內定居和繁殖分泌腸毒素。ETEC作用的基礎是能夠黏附于腸道上皮細胞上，這一功能由細菌表面的菌毛所介導，菌毛黏附素與上皮細胞上的受體結合，兩種物質在構型上相互匹配，菌毛黏附素可以接近上皮細胞與受體以共價鍵結合在一起，引起上皮細胞的蛋白磷酸化，細胞間Ca⁺升高，隨后定植在腸道內大量繁殖，在ETEC生長過程中釋放大量的腸毒素引起細胞內水和電解質失衡，從而產生腹瀉。菌毛是細菌識別腸上皮細胞受體的重要結構，不同ETEC的菌毛抗原類型不同，其中以K88最為普遍和最為重要。根據血清型不同，K88可分為K88ab、K88ac和K88ad，對于K88的3種血清型，流行病調查表明K88ac是引起仔豬腹瀉的主要病原菌，有研究通過檢測腹瀉仔豬體內44株陽性大腸桿菌發現，96％大腸桿菌有K88ac菌毛基因，僅有4％的大腸桿菌含有K88ab菌毛基因。K88菌毛的化學本質為蛋白質，為直徑約2.1nm的絲狀、柔毛樣結構，K88菌毛蛋白的相對分子量在23.5-26.0之間。菌毛基因表達受溫度、pH值和培養基組成的影響調控，37℃時表達良好，18℃～25℃時只產生少量菌毛，18℃以下時不產生菌毛。

編碼K88菌毛的基因由faeA至faeJ這10個基因所構成，所編碼的蛋白對應為FaeA至FaeJ，見圖1。K88菌毛由幾百個蛋白亞基構成，其中FaeG是主要結構蛋白，由faeG基因編碼，分子量為27.5kDa，FaeG蛋白不僅含有大量的K88菌毛抗原決定簇，而且含有與K88受體結合的位點，除了FaeG亞基蛋白外，一些小分子蛋白如FaeC、FaeF、FaeH也是菌毛的組成部分。FaeC蛋白分子量為16.9kDa，位于菌毛頂端與啟動菌毛的合成有關。FaeF(15.2kDa)和FaeH(25.5kDa)是影響菌毛合成的重要因素，參與菌毛的延伸過程，可以形成新生菌毛的支架，常分布于菌毛軸心兩側的菌毛體中，FaeD和FaeE是負責轉運菌毛大小亞基蛋白穿過細胞周質和細胞膜的蛋白，K88菌毛中主要亞基和次要亞基在穿過大腸桿菌細胞質膜和外膜時至少需要FaeE和FaeD兩種蛋白的協助。FaeE可以與菌毛蛋白FaeG、FaeH和FaeI在細胞周質形成異源蛋白復合物，防止提前聚合或被降解，傳遞菌毛亞基蛋白給外膜的FaeD轉運蛋白，FaeD則轉運菌毛亞基蛋白至胞外形成菌毛，同時將菌毛固定于細胞表面。FaeA是阻遏蛋白，FaeB是激活蛋白，兩種蛋白主要起調控菌毛表達的作用，不參與K88菌毛的組成。