[發明專利]胰島素抵抗動物模型的建立方法

在審

• 申請號: 201811016948.0
• 申請日: 2018-09-03
• 公開（公告）號: CN109430156A
• 公開（公告）日: 2019-03-08
• 發明（設計）人: 李冰
• 申請（專利權）人: 浦江縣歐立生物技術有限公司
• 主分類號: A01K67/02
• 分類號: A01K67/02;A23K50/50;A23K20/20;A23K20/168;A23K20/163;A23K20/158;A23K20/105
• 代理公司: 北京國翰知識產權代理事務所(普通合伙) 11696
• 代理人: 衛翠婷

本發明公開了胰島素抵抗動物模型的建立方法，使用高硒高糖高脂飼料和低濃度果糖飲用水誘導遺傳背景高度相似的近交系C57BL/6小鼠，造成其糖脂代謝紊亂，進而誘導胰島素抵抗的發生，建立胰島素抵抗動物模型。通過對飼料的獨特配比，高度模擬由于飲食結構發生改變而導致的胰島素抵抗的發病過程，所誘導的動物模型與對照組比，模型組動物口服糖耐量、胰島素耐量、動物胰島素抵抗指數及胰島素敏感指數與正常對照組動物有顯著差異，表明模型組動物已經發生明顯的胰島素抵抗。有益效果為：本發明采用獨特飼料，兩種方式飼喂，排除了化學試劑產生的不良反應，具有造模方法簡單、成模率高、成本低以及重現性好的優勢。

技術領域

本發明涉及動物模型構建技術領域，尤其是涉及胰島素抵抗動物模型的建立方法。

背景技術

動物模型的構建是醫學研究中的一項很重要的技術。構建與人類發病相似的疾病模型，可以克服人類本身發生疾病潛伏期長、影響因素多、發生發展緩慢、發病機制復雜等因素的制約，更好地反應疾病發生、發展的規律，并有利于研究不便于在人類本身進行研究的疾病。常用的動物模型主要包括自發性動物模型、轉基因動物模型和實驗性動物模型。自發性動物模型、轉基因動物模型應用價值較高，但其造模成本高、技術飼養條件要求高等特點限制了這些動物模型的普遍應用。實驗性動物模型操作簡單、成本低、成模率較高，目前，這類動物模型被廣泛使用。

近年來，糖尿病患病率快速、大幅上升，成為全球范圍內的一個重大公共衛生問題。2型糖尿病患者占糖尿病總人數的90％以上，胰島素抵抗是2型糖尿病的基本病理生理機制。胰島素抵抗是指肝、肌肉、脂肪等胰島素作用的靶組織，不能響應胰島素導致胰島素的功能減弱甚至缺失的病理狀態。除2型糖尿病之外，胰島素抵抗還與高血壓、動脈粥樣硬化、代謝綜合征的發生發展密切相關。因此，對胰島素抵抗的發病機制及防治研究顯得尤為重要。目前，胰島素抵抗的發病機制還不明確。

現有技術如授權公告號為CN 103211834 B的中國發明專利，公開了一種造模方法簡單、成本低、周期短的高硒誘導胰島素抵抗動物模型的應用及構建方法，利用SD大鼠，每天灌胃100μg/kg-200μg/kg的硒，6周后得到胰島素抵抗動物模型。對糖耐量和胰島素耐量的統計分析、胰島素信號傳導和糖異生關鍵酶的測定表明：利用硒酸鈉構建的胰島素抵抗大鼠模型是可行的，可作為高硒誘導胰島素抵抗以及2型糖尿病的發病機制和藥物作用機理的研究模型。但是該高硒誘導胰島素抵抗動物模型是由單一高硒因素誘導所致，造出的動物模型穩定性不強，所用單一高硒因素也易導致結果差別過大，致使造模的致病程度存在一定差異。

發明內容

本發明的目的在于提供一種利用C57BL/6小鼠建立經高糖高脂高硒飼料和果糖溶液誘導的，造模方法簡單、成模率高、重現性好的胰島素抵抗動物模型的建立方法。

本發明針對上述技術中提到的問題，采取的技術方案為：

胰島素抵抗動物模型的建立方法，包括選取鼠種、分組與造模、采血與檢測，通過同時飼喂高糖高脂高硒飼料與飲用果糖溶液造成糖脂代謝紊亂，進而誘導雄性小鼠產生胰島素抵抗，得到胰島素抵抗動物模型，具體步驟為：

選取鼠種：SPF級雄性C57BL/6小鼠，4-6周齡，體重22±2g，飼養于本部屏障環境內，溫度22-25℃，濕度45-55％，12小時晝夜交替，適應性喂養1周；C57BL/6小鼠為近交系小鼠，遺傳背景高度相似，在一定程度上保證了模型的穩定性；

分組與造模：適應性喂養1周后，在分組上模型組與對照組均采取正態分布分組方法，即以小鼠體重為依據，將小鼠劃分為高、中、低三個體重區間，將每個區間隨機分配到模型組和對照組中，模型組和對照組，每組15只，模型組喂食高糖高脂高硒飼料、飲用果糖溶液，對照組喂食標準飼料、飲用蒸餾水，在飼養方法上采取單只單籠飼養措施，飼料定量定投，早晚各一次，維持25g/籠，保證較小的組內差異，2-3天換墊料，給籠具消毒，墊料為刨花木屑，里面含有小木塊，要求高壓滅菌，造模10周，每周檢測體重和隨機血糖值；