[發明專利]一種具有抗炎癥性腸病活性的羧甲基茯苓多糖及其制備與應用

在審

• 申請號: 201811013168.0
• 申請日: 2018-08-31
• 公開（公告）號: CN109232768A
• 公開（公告）日: 2019-01-18
• 發明（設計）人: 張學武;劉曉菲;徐曉飛
• 申請（專利權）人: 華南理工大學
• 主分類號: C08B37/02
• 分類號: C08B37/02;A61K31/715;A61P39/06;A61P35/00;A61P29/00;A61P37/02
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102
• 代理人: 何淑珍

1. 一種羧甲基茯苓多糖CMP33的制備方法，其特征是所述多糖是利用DEAE-52纖維素層析柱、Sephadex-G200+Sephadex-G150層析柱聯用，對現有的羧甲基茯苓粗多糖進行分離純化，以0.1 mol/L NaCl溶液為洗脫液洗脫得到的羧甲基茯苓多糖CMP33。

2. 如權利要求1 所述的一種羧甲基茯苓多糖CMP44的制備方法，其特征在于所述現有羧甲基茯苓粗多糖由中國專利文獻CN 105348407 A公開的羧甲基茯苓多糖的制備工藝制得。

3. 如權利要求1 所述的一種羧甲基茯苓多糖CMP33的制備方法，其特征是所述多糖CMP33的單糖組成為D-葡萄糖，所述多糖分子量為15.23×10⁴ Da，結構為（1→3）-β-D-葡聚糖，含有（1→6）和（1→2）糖苷鍵，具有三螺旋結構。

4.由權利要求1~3任一項所述制備方法制得一種羧甲基茯苓多糖CMP33。

5.如權利要求4 所述的一種羧甲基茯苓多糖CMP33，其特征在于CMP33對自由基DPPH?、ABTS+、?OH的EC50值分別為3.62 mg/mL、3.55 mg/mL、2.31 mg/mL。

6. 如權利要求1 所述的一種羧甲基茯苓多糖CMP33，其特征是所述多糖CMP33在31.25-1000 μg/mL濃度范圍內對結腸癌細胞HT-29、肝癌細胞HepG-2、乳腺癌細胞MCF-7、胃癌細胞SGC-7901以及肺癌細胞A549細胞增殖有抑制作用，對應的IC50值分別為113.3μg/mL、282.7μg/mL、385.8μg/mL、79.56μg/mL、204.1μg/mL。

7. 如權利要求1 所述的一種羧甲基茯苓多糖CMP33，其特征是所述多糖CMP33 能顯著抑制脂多糖LPS誘導的小鼠單核巨噬細胞RAW264.7釋放一氧化氮（NO）、白介素-6（IL-6）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）及白介素-1β（IL-1β），在31.25-1000 μg/mL濃度范圍內，對LPS誘導的NO、IL-6、TNF-α及IL-1β生成的抑制率分別達到52.31%、47.96%、79.68%及51.80%，具有抗炎活性。

8. 如權利要求1 所述的一種羧甲基茯苓多糖CMP33，其特征是所述多糖CMP33無LPS誘導時可激活RAW264.7細胞分泌NO、IL-6、TNF-α及IL-1β，具有免疫調節作用。

9. 如權利要求1 所述的一種羧甲基茯苓多糖CMP33，其特征是所述多糖CMP33灌胃給藥處理改善三硝基苯磺酸（TNBS）誘導的炎癥性腸病（IBD）小鼠的宏觀表現，降低小鼠結腸病理切片組織學評分，降低小鼠結腸組織髓過氧化物酶（MPO）活性和丙二醛（MDA）的含量。

10.權利要求4所述的一種羧甲基茯苓多糖CMP33的應用，其特征是所述多糖CMP33在制備功能食品與生物制藥中的應用，具有抗氧化、抗腫瘤、抗炎、免疫調節及抗炎癥性腸病（IBD）的活性。