[發明專利]六出花生殖芽頂端組織的微繁方法

有效

• 申請號: 201811008231.1
• 申請日: 2018-08-31
• 公開（公告）號: CN109156345B
• 公開（公告）日: 2021-11-12
• 發明（設計）人: 周興元;周余華;王紅梅;張虎;姚天昊
• 申請（專利權）人: 江蘇農林職業技術學院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 南京蘇高專利商標事務所(普通合伙) 32204
• 代理人: 張秀

本發明公開了一種六出花生殖芽頂端組織的微繁方法，包括步驟：(1)在4月份采集六出花的根莖芽或生殖芽，或在7月份采集營養芽，并取芽頂端分生組織作為外植體，且將外植體修成2?4cm長待用。(2)將外植體清洗、消毒。(3)置于初代培養基上進行初代培養，得到發芽的外植體。(4)在繼代培養基上繼代培養4代，得到生根后的組織苗。(5)煉苗，得到六出花苗木。本發明采用組培方法，可以避免種子繁殖出現變異的現象，可以對六出花優良品種進行大量繁殖，使六出花組培繁殖更為豐富，能夠滿足市場需要。

技術領域

本發明涉及農林技術領域，尤其涉及六出花苗木的組織培養方法。

背景技術

六出花(Alstroemeria aurantiaca D.Don)也叫智利百合、秘魯百合等，是石蒜科、六出花屬多年生草本，國外有的國家歸在百合科下。其花色豐富、花朵艷麗、品種繁多，是盆栽、切花、花壇栽培的上佳品種。繁殖常用種子、分株繁殖，但對優良品種的繁殖則常用分株繁殖。

分株繁殖雖然是常用方法，但對六出花優良品種的繁殖來說，是除組培外唯一的一種方法了(種子繁殖由于后代易發生變異，一般情況下用于新品種選育，良種擴繁時不適用)，并且運用組培方法進行繁殖在國內外均不成熟。而分株法對六出花的擴繁來說相當緩慢，滿足不了市場需求。六出花在荷蘭有很多品種，但購入必須要交一大筆品種權費用，所以無法大面積繁殖。

在組織培養技術中，采用生殖芽培養進行大規模繁殖供給市場是可能的，但相對于其它很多科屬植物來說，石蒜科植物的繁殖是很困難的，國內在生產上組培也沒有先例。

在組織培養中，采用六出花根莖上長出的莖頂組織進行培養，遭受雜菌污染比較嚴重，把根莖挖出后，從根上的切痕帶來的病菌污染、母株的生長勢低下所帶來的生育障礙等等原因，使得采用根莖以外的組織進行大量繁殖成為可能。

有學者采用生殖芽頂端組織對六出花的組織培養繁殖進行研究，其它組培方式基本沒有。

發明內容

發明目的：本發明提供了一種六出花生殖芽頂端組織的微繁方法，該方法解決了現有的六出花常用種子、分株繁殖方法無法大面積繁殖的問題；同時，滿足了市場需求。

技術方案：本發明的六出花生殖芽頂端組織的微繁方法，包括以下步驟：

(1)在4月份采集六出花的根莖芽或生殖芽，或在7月份采集營養芽，并取芽頂端分生組織作為外植體，且將外植體修成2-4cm長待用，優選3cm。

(2)將外植體清洗、消毒。

(3)在無菌條件下，將帶有1-2個葉原基的頂端分生組織置于初代培養基上，在22-27℃、每天16h 3000lux光照條件下進行初代培養，6周后外植體基部發芽，得到發芽的外植體，溫度優選25℃。

(4)對發芽的外植體進行切割修成2-4cm，優選3cm置于繼代培養基上，繼代培養4代，得到生根后的組織苗。

(5)將生根后的組培苗洗凈、殺菌，栽植于泥炭土中，之后6周內保濕、遮光，得到六出花苗木。

其中，步驟(2)中，所述清洗采用洗衣粉溶液；所述消毒采用0.5％次氯酸鈉浸泡。

步驟(3)中，所述初代培養基采用MS，并添加蔗糖0.3％。

所述初代培養基還添加激素6-BA和NAA，濃度在0-10mg/L。

步驟(4)中，所述繼代培養基采用MS，且MS培養基中的N素濃度為 25-100％，添加蔗糖3-12％，并添加激素6-BA和NAA，濃度在0-10mg/L。

步驟(5)中，所述洗凈采用水下12h洗凈；所述殺菌采用多菌靈2000倍殺菌，并每2周噴1次。

具體步驟如下：

(1)材料采集