[發明專利]一種酶活提高的α-淀粉酶突變體及其應用有效
| 申請號: | 201811002140.7 | 申請日: | 2018-08-30 |
| 公開(公告)號: | CN109022396B | 公開(公告)日: | 2021-03-30 |
| 發明(設計)人: | 吳敬;宿玲恰;姚動邦 | 申請(專利權)人: | 江南大學 |
| 主分類號: | C12N9/28 | 分類號: | C12N9/28;C12N15/56;C12N15/63;C12N1/21;C12P19/14;C12P19/04;C12P19/02;C12P19/12;C12R1/125 |
| 代理公司: | 哈爾濱市陽光惠遠知識產權代理有限公司 23211 | 代理人: | 張勇 |
| 地址: | 214000 江*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 提高 淀粉酶 突變體 及其 應用 | ||
1.一種酶活提高的α-淀粉酶突變體,其特征在于,所述酶突變體是通過將氨基酸序列為SEQ ID NO.1的α-淀粉酶的第405位氨基酸由絲氨酸突變為精氨酸得到的;
或所述酶突變體是通過同時將氨基酸序列為SEQ ID NO.1的α-淀粉酶的第82位氨基酸由賴氨酸突變為谷氨酸以及第405位氨基酸由絲氨酸突變為精氨酸得到的。
2.如權利要求1所述的一種酶活提高的α-淀粉酶突變體,其特征在于,所述α-淀粉酶的來源為嗜熱脂肪芽孢桿菌(
3.如權利要求1或2所述的一種酶活提高的α-淀粉酶突變體,其特征在于,所述α-淀粉酶突變體的氨基酸序列為SEQ ID NO.3或SEQ ID NO.4。
4.編碼權利要求1-3任一所述的一種酶活提高的α-淀粉酶突變體的基因。
5.攜帶權利要求4所述基因的重組質粒。
6.如權利要求5所述的重組質粒,其特征在于,所述重組質粒的構建方法為先根據確定的突變位點,設計定點突變的突變引物,再根據設計的突變引物,以攜帶α-淀粉酶基因的載體為模板進行定點突變。
7.攜帶權利要求4所述基因或權利要求5或6所述重組質粒的宿主細胞。
8.如權利要求7所述的宿主細胞,其特征在于,所述宿主細胞為枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)WS5。
9.權利要求1-3任一所述的一種酶活提高的α-淀粉酶突變體,或權利要求4所述的基因,或權利要求5或6所述的重組質粒,或權利要求7或8所述的宿主細胞在水解淀粉、制備糊精、制備低聚糖、制備麥芽糖以及制備葡萄糖方面的應用。
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