[發明專利]一種聯合檢測Aβ-40和Aβ-42的檢測試劑條及其應用

在審

• 申請號: 201811000652.X
• 申請日: 2018-08-30
• 公開（公告）號: CN109142716A
• 公開（公告）日: 2019-01-04
• 發明（設計）人: 周小進;繆志剛
• 申請（專利權）人: 蘇州仁端生物醫藥科技有限公司
• 主分類號: G01N33/543
• 分類號: G01N33/543;G01N33/558;G01N21/76
• 代理公司: 北京品源專利代理有限公司 11332
• 代理人: 鞏克棟

本發明提供了一種聯合檢測Aβ?40和Aβ?42的檢測試劑條及其應用，所述試劑條(1)包括從上到下依次設置的儲液腔層、流道層和反應腔層；所述儲液腔層設置有至少一個儲液腔(4)；所述反應腔層設置有至少一個反應腔(2)；所述流道層設置有微流通道(8)，用于連通儲液腔(4)和反應腔(2)。本發明的試劑條基于微流控技術，將檢測試劑集成一體化，避免了試劑污染，降低了運輸成本，所述試劑條裝載于檢測儀器上，實現了自動化分子檢測，消除了開放體系可能存在的污染和人為操作引起的實驗誤差，在Aβ?40和Aβ?42的早期檢測中具有重要應用。

技術領域

本發明屬于蛋白檢測領域，涉及一種聯合檢測Aβ-40和Aβ-42的檢測試劑條及其應用，尤其涉及一種基于磁微粒和化學發光技術的聯合檢測Aβ-40和Aβ-42的檢測試劑條及其應用。

背景技術

據統計，全球有近3000萬阿爾茲海默癥(Alzheimer disease，AD)患者。阿爾茲海默癥對老年人的危害及其嚴重，確診后平均生存期僅10年，目前仍屬于醫學界無法治愈的惡性老年精神疾病。對于60歲以上的人群，隨著年齡的增長，阿爾茲海默癥的發病率急劇升高。在中國，65歲以上人群的阿爾茲海默癥發病率為7％，85歲以上人群的發病率為25％，而95歲以上人群的發病率則高達60％。早期阿爾茲海默癥無明顯癥狀，難以診斷，極易被誤診。

阿爾茲海默癥研究協會認為，阿爾茲海默癥的病變進展緩慢，早期診斷、早期干預能夠顯著延緩病變的發生，對于降低發病率至關重要，有利于維持患者的正常生活。同時，早期診斷有助于區分阿爾茲海默癥患者和阿爾茲海默癥疑似病患者，提高診斷準確性。

β淀粉樣蛋白(Aβ)是淀粉樣蛋白前體(APP)經蛋白水解酶作用后的底物，由第21號染色體編碼，是阿爾茨默海癥的主要病理蛋白之一。APP被至少3種酶加工，其切割途徑包括分泌酶途徑和分泌酶途徑II。在分泌酶途徑中，APP首先被β-分泌酶裂解，隨后在γ-分泌酶作用下，被切割形成含有39-43個氨基酸的多肽。其中，Aβ-42和Aβ-40是最常見的亞型，Aβ-42是由42-43個氨基酸組成的蛋白質片斷，主要位于阿爾茨默海癥患者的腦內；在腦脊液和血液中，Aβ-40的含量遠高于Aβ-42，但Aβ-42更具毒性，更易聚集。

CN 1928564A公開了一種檢測Aβ_1-42抗體的方法及其試劑盒，該方法包括利用Aβ_1-42蛋白片段溶液包被固相支持物；將待檢測的生物學樣本加入固相支持物并孵育；清洗去除未結合的蛋白等雜物；再加入Aβ_1-42單克隆抗體溶液并孵育；清洗去除未結合的Aβ_1-42單克隆抗體加入經標記的第二抗體并孵育；清洗去除任何未結合的第二抗體；檢測孵育混合物中抗原抗體免疫結合復合物的存在量。所述檢測方法具有較高的準確性，方法簡便、實用，其采用競爭酶聯免疫檢測法，對抗體可以作定量檢測，方法簡便，適合臨床普遍采用。然而尚未有現有技術用于Aβ-40的檢測，且酶聯免疫檢測無法避免外界激發光源背景信號的干擾，信噪比低、靈敏度差，不適用于阿爾茲海默癥的早期診斷。

因此，提供一種靈敏度高、特異性強、與自動化檢測設備兼容性強的Aβ-40檢測試劑條，在阿爾茲海默癥研究領域具有重要意義。

發明內容

針對現有技術的不足，本發明提供一種聯合檢測Aβ-40和Aβ-42的檢測試劑條及其應用，所述試劑條基于微流控技術和磁微粒化學發光技術，特異性強、靈敏度高、準確性好，Aβ-40和Aβ-42檢測試劑均裝載于試劑條上，實現了試劑條的集成一體化，與檢測分析設備相配合，實現了Aβ-40和Aβ-42的自動化、高靈敏、快速聯合檢測，在于阿爾茲海默癥的早期診斷領域具有重要意義。

為達此目的，本發明采用以下技術方案：

第一方面，本發明提供了一種試劑條，所述試劑條1包括從上到下依次設置的儲液腔層、流道層和反應腔層；

所述儲液腔層設置有至少一個儲液腔4；