[發明專利]一種中和貝伐珠單抗的單克隆抗體及其應用

有效

• 申請號: 201810998933.2
• 申請日: 2018-08-30
• 公開（公告）號: CN108623688B
• 公開（公告）日: 2018-12-18
• 發明（設計）人: 邵喆;劉聰;劉鈺山;黃應峰
• 申請（專利權）人: 寶船生物醫藥科技（上海）有限公司;白帆生物科技(上海)有限公司
• 主分類號: C07K16/42
• 分類號: C07K16/42;C12N5/20;G01N33/577;C12R1/91
• 代理公司: 北京品源專利代理有限公司 11332
• 代理人: 孟金喆

本發明提供了一種中和貝伐珠單抗的單克隆抗體及其應用，所述單克隆抗體的輕鏈CDR1的氨基酸序列為SEQ ID NO.3，輕鏈CDR2的氨基酸序列為SEQ ID NO.4，輕鏈CDR3的氨基酸序列為SEQ ID NO.5；所述單克隆抗體的重鏈CDR1的氨基酸序列為SEQ ID NO.6，重鏈CDR2的氨基酸序列為SEQ ID NO.7，重鏈CDR3的氨基酸序列為SEQ ID NO.8；本發明通過大量復雜實驗篩選并驗證了所述單克隆抗體能特異性結合貝伐珠單抗，并能夠阻斷貝伐珠單抗與VEGF結合，該抗體能夠研究貝伐珠單抗在臨床前和臨床試驗中的免疫原性，監測評估免疫原性試驗的敏感性和特異性，具有廣闊的應用前景和巨大的市場價值。

技術領域

本發明涉及生物技術領域，尤其涉及一種中和貝伐珠單抗的單克隆抗體及其應用。

背景技術

近年來，抗體藥物以其安全有效、特異性高等優點被廣泛應用于腫瘤、移植排異、感染性疾病、自身免疫疾病等多種疾病的臨床治療。但選用抗體藥物進行治療會出現一個不容忽視的問題，即抗體藥物免疫原性對治療的影響，這些免疫原性不但會引起機體的急性過敏反應，同時對藥物本身也具有競爭抑制作用。對抗體藥物免疫原性的檢測是生物技術藥物申請臨床試驗和注冊的重要內容。盡管在動物模型中顯示免疫原性并不一定預期在人體也會出現免疫反應，但評價藥物引起的免疫反應仍顯得十分重要。

貝伐珠單抗是一種以VEGF為特異性靶點的重組人源化IgG1型單克隆抗體，它能競爭性抑制VEGF與VEGF受體的結合，抑制下游信號通路的激活，促進腫瘤細胞凋亡，可用于治療轉移型結腸直腸癌、非小細胞肺癌和乳腺癌等。目前，評估抗體藥物的免疫原性主要從兩個方面進行，一方面是檢測病人有沒有產生抗藥抗體，另一方面檢測病人產生的抗藥抗體有無阻斷藥物與靶位點結合的能力，即抗體的中和性能。在各種評估免疫原性的檢測方法中，都需要有陽性對照，用于監測方法的敏感性和特異性。美國FDA推薦使用能識別抗體藥物可變區的抗體作為免疫原性檢測的陽性對照抗體，用于評估ADA分析方法的靈敏度。

目前常用的陽性抗體包括親和純化的多克隆抗體(一般來源于兔或羊)，盡管這類抗體能在某種程度上代表體內抗藥抗體的多樣性，但由于抗原親和純化收率低，每批產量有限，且不同批次間活性差異大，可能影響從臨床前到臨床試驗中免疫原性評價的連貫性。而單克隆抗體的生產過程經濟且靈活，易于純化，收益高，且不同批次擁有穩定的結合活性，易于商業化生產，是良好的評估抗體藥物免疫原性的陽性參照，但現今市場上缺乏特異抗貝伐珠可變區的單抗。

因此，研發一種特異性抗貝伐珠可變區的單抗，分析貝伐珠單抗的臨床前和臨床試驗中的免疫原性，作為監測評估免疫原性試驗的敏感性和特異性的陽性對照，具有廣闊的應用前景和巨大的市場價值。

發明內容

針對現有技術的不足及實際的需求，本發明提供一種中和貝伐珠單抗的單克隆抗體及其應用，所述單克隆抗體能特異性結合貝伐珠單抗，并能夠阻斷貝伐珠單抗與VEGF結合，能夠作為陽性對照抗體，研究貝伐珠單抗在臨床前和臨床試驗中的免疫原性，監測評估免疫原性試驗的敏感性和特異性，具有廣闊的應用前景和巨大的市場價值。

為達此目的，本發明采用以下技術方案：

第一方面，本發明提供一種中和貝伐珠單抗的單克隆抗體，所述單克隆抗體的輕鏈CDR1的氨基酸序列為SEQ ID NO.3，輕鏈CDR2的氨基酸序列為SEQ ID NO.4，輕鏈CDR3的氨基酸序列為SEQ ID NO.5；

所述單克隆抗體的重鏈CDR1的氨基酸序列為SEQ ID NO.6，重鏈CDR2的氨基酸序列為SEQ ID NO.7，重鏈CDR3的氨基酸序列為SEQ ID NO.8。

所述單克隆抗體Fab段的輕鏈氨基酸序列為SEQ ID NO.1，所述單克隆抗體Fab段的重鏈氨基酸序列為SEQ ID NO.2。

所述SEQ ID NO.1如下所示：