[發(fā)明專利]一種流式電轉(zhuǎn)染裝置

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810993912.1
• 申請日: 2018-08-29
• 公開（公告）號: CN110872559A
• 公開（公告）日: 2020-03-10
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 戴曉兵;朱士英;徐莉
• 申請（專利權(quán)）人: 蘇州壹達生物科技有限公司
• 主分類號: C12M1/42
• 分類號: C12M1/42
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發(fā)明提供一種流式電轉(zhuǎn)染裝置，包括管體，第一電極，第二電極，固定第一電極的支架，固定第二電極的支架，其特征在于，所述管體兩端開口的管口處設(shè)置凹槽，所述固定第一電極的支架和固定第二電極的支架分別設(shè)置于凹槽中，所述第一電極和第二電極的形狀與所述管體中部橫截面的形狀相同，所述管體與第一電極和第二電極組成腔體，所述固定第一電極的支架和固定第二電極的支架設(shè)置間隙，液體通過間隙進入和/或流出腔體。本發(fā)明的流式電轉(zhuǎn)染裝置必須在液體充滿腔體的時候，才能夠形成電轉(zhuǎn)染，保證細胞進行電轉(zhuǎn)染的時間相同，提高電轉(zhuǎn)染效率的同時提高細胞處理量。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及電轉(zhuǎn)染領(lǐng)域，涉及一種流式電轉(zhuǎn)染裝置，特別是涉及一種流體浸滿裝置后才能進行電轉(zhuǎn)染的方法。

背景技術(shù)

細胞膜是包圍在細胞外周的一層薄膜，是細胞與外界進行選擇性物質(zhì)交換的通透性屏障。細胞膜使細胞成為一個獨立的生命單位，并擁有一個相對穩(wěn)定的內(nèi)環(huán)境。周圍環(huán)境中的一些物質(zhì)可以通過細胞膜，其它的物質(zhì)則不行。細胞可以通過細胞膜從周圍環(huán)境攝取養(yǎng)料，排出代謝產(chǎn)物，使物質(zhì)的轉(zhuǎn)運達到平衡狀態(tài)。所以，細胞膜的基本功能就是維持細胞內(nèi)微環(huán)境的相對穩(wěn)定并有選擇地與外界環(huán)境進行物質(zhì)交換。

研究發(fā)現(xiàn)，如果對細胞施加一定強度的電刺激并持續(xù)一段時間，就可以誘導(dǎo)細胞膜上產(chǎn)生一些微孔，使細胞的通透性增強，所謂細胞電轉(zhuǎn)染(Electroporation)就是指細胞在外加脈沖電場的作用下，細胞膜脂雙層上形成瞬時微孔的生物物理過程。當(dāng)細胞膜發(fā)生電轉(zhuǎn)染時，其通透性和膜電導(dǎo)會瞬時增大，使親水分子、DNA、蛋白質(zhì)、病毒顆粒、藥物顆粒等正常情況下不能通過細胞膜的分子得以進入細胞。在短時間內(nèi)撤除電刺激后，細胞膜可以自我恢復(fù)，重新成為選擇性通透屏障。與傳統(tǒng)的化學(xué)轉(zhuǎn)染和病毒轉(zhuǎn)染相比，由于電轉(zhuǎn)染具有無化學(xué)污染、不會對細胞造成永久性損傷、效率較高等優(yōu)點，在生物物理學(xué)、分子生物學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域有著廣闊的應(yīng)用前景。

雖然電轉(zhuǎn)染作用的機理并不完全清楚，但在本文中細胞電轉(zhuǎn)染是公知的，包括細胞膜脂雙層的破裂，導(dǎo)致在膜上形成暫時性的微孔，允許外源性分子通過擴散進入細胞。

現(xiàn)有技術(shù)中，主要有三類方法來完成細胞電轉(zhuǎn)染的過程：

將細胞放置于一對相距數(shù)毫米至數(shù)厘米的平行電極之間。使細胞在電極之間的電場中受到電刺激，以實現(xiàn)電轉(zhuǎn)染的目的。例如，美國專利US5389069。

使用微型針狀電極扎入組織或細胞中對細胞進行電擊，達到電轉(zhuǎn)染的目的。例如，美國專利US5389069。

將一個腔室放置在一對平行電極之間，使得細胞的懸浮溶液在腔室中流動的同時受到電擊。例如，美國專利US6773669。

在現(xiàn)有技術(shù)中公開的電轉(zhuǎn)染設(shè)備及方法大部分不適用于處理大量的樣品，也不適用于連續(xù)處理樣品。也就是說，現(xiàn)有技術(shù)中得到的電轉(zhuǎn)染室均是“靜態(tài)”工作的，即：在電轉(zhuǎn)染室處理完一批樣品以后，需要對電轉(zhuǎn)染室進行清洗、重新加入細胞等處理，才能繼續(xù)下一批樣品處理。在公開的技術(shù)中，電轉(zhuǎn)染常常是在一次性單室樣品管中進行的，其用于電轉(zhuǎn)染的最大容量通常小于1毫升。在需要處理大量樣品的場合中，這種技術(shù)冗長乏味，勞動強度大。研究人員在此基礎(chǔ)上，發(fā)明了多個電轉(zhuǎn)染腔并聯(lián)的形式，這種技術(shù)有其優(yōu)點，但卻不能根本解決難以實現(xiàn)快速處理大量樣品的困難。

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是細胞液處理體積偏小的技術(shù)問題，提供了一種流式電轉(zhuǎn)染裝置；同時還解決了流式電轉(zhuǎn)染裝置難以控制處理細胞的時間相同的技術(shù)問題。

發(fā)明內(nèi)容

為了達到上述目的，本發(fā)明所提供的流式電轉(zhuǎn)染裝置的技術(shù)方案概述如下：

本發(fā)明提供的流式電穿孔裝置，所述裝置包括絕緣管體，管體內(nèi)部具有用于容納目標液體樣本的腔體，管體的下端設(shè)有與腔體相連通的第一電極，正下方為進液口；管體的上端設(shè)有與腔體相連通的第二電極，正上方為出液口；所述第一電極或第二電極的直徑與管體內(nèi)徑等大；電極四周有環(huán)形間隙裝置，液體樣本可以繞過電極流動；電極由支架固定在管體兩端。